| 多基原九里香药材的多重位点特异性PCR鉴别 |
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| 引用本文： | 陈梓媛,赵玉洋,谢旭桃,谢文波,金艳,蒋超,袁媛. 多基原九里香药材的多重位点特异性PCR鉴别[J]. 中国实验方剂学杂志, 2022, 28(17): 106-112 |
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| 作者姓名： | 陈梓媛 赵玉洋 谢旭桃 谢文波 金艳 蒋超 袁媛 |
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| 作者单位： | 1.中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地,北京 100700;2.华润三九医药股份有限公司,广东 深圳 518029 |
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| 基金项目： | 中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目（CI2021A041）;国家科技部科技基础资源调查专项（2018FY100800）;中央本级重大增减支项目（2060302）;青年岐黄学者项目;东城区优秀人才培养项目（2021-dchrcpyzz-7） |
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| 摘 要： | 目的 建立一种同时鉴别九里香药材两基原九里香Murraya exotica和千里香M. paniculata的DNA分子鉴别方法。方法 通过比较九里香、千里香的叶绿体基因组序列差异,根据叶绿体基因组上的单核苷酸多态性（SNP）变异位点分别设计九里香和千里香的特异性鉴别引物P03和P04,对影响聚合酶链式反应（PCR）结果的退火温度、循环次数、引物浓度比进行优化,建立了九里香和千里香的多重位点特异性PCR鉴别方法,并对影响该方法重复性的Taq酶种类、PCR仪型号进行耐受性考察和适用性考察。结果 在该多重位点特异性PCR鉴别方法中,当PCR反应循环数为31次,退火温度为60 ℃,九里香P03和千里香P04引物比为1∶2时,九里香可获得约330 bp的特异性条带,千里香可得到约230 bp的特异性条带,不同来源的九里香和千里香样品使用建立的多重位点特异性PCR鉴别方法均可获得一致结果。结论 该文建立一种快速、准确鉴别九里香药材基原的多重位点特异性PCR鉴别方法,可在单次鉴定操作中根据条带位置同时鉴别九里香和千里香。
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| 关 键 词： | 九里香 千里香 多重位点特异性聚合酶链式反应（PCR） 分子鉴别 |
| 收稿时间： | 2022-01-22 |
Identification of Murrayae Folium et Cacumen by Multiplex Allele-Specific PCR |
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| CHEN Ziyuan,ZHAO Yuyang,XIE Xutao,XIE Wenbo,JIN Yan,JIANG Chao,YUAN Yuan. Identification of Murrayae Folium et Cacumen by Multiplex Allele-Specific PCR[J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2022, 28(17): 106-112 |
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| Authors: | CHEN Ziyuan ZHAO Yuyang XIE Xutao XIE Wenbo JIN Yan JIANG Chao YUAN Yuan |
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