基于VIP/cAMP/PKA/AQPs信号通路研究肺肠合治法减轻肺水肿治疗急性肺损伤的作用机制

目的 探究肺肠合治法（麻黄汤+大承气汤）减轻脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺水肿的作用和机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、肺肠合治低、中、高剂量组、地塞米松组。采用LPS（10 mg·kg^-1）腹腔注射复制ALI大鼠模型,造模后开始灌胃给药,正常组给予生理盐水（25 mL·kg^-1）,肺肠合治低（5 g·kg^-1）、中（7.5 g·kg^-1）、高（10 g·kg^-1）剂量组分别给予（麻黄汤+大承气汤）灌胃,阳性药组给予地塞米松（5 mg·kg^-1）,分别于LPS注射后0、8、16 h给药,共3次。给药结束后取肺组织及血清,肺组织苏木素-伊红（HE）染色,进行肺水肿评分;计算各组大鼠肺组织干/湿（D/W）质量比;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清血管活性肠肽（VIP）含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）、水通道蛋白5（AQP5）、VIP、环磷酸腺苷（cAMP）、磷酸化蛋白激酶A（p-PKA）、蛋白激酶A（PKA）蛋白的表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠肺组织中VIP mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠肺损伤明显,水肿评分升高,肺组织D/W降低（P<0.01）,肺组织AQP1、AQP5、cAMP、p-PKA/PKA明显降低（P<0.05,P<0.01）,VIP含量显著升高（P<0.01）,肺组织VIP蛋白和mRNA表达明显升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,肺肠合治组大鼠肺损伤减轻,肺组织D/W显著升高（P<0.01）,肺组织AQP1、AQP5、VIP、cAMP、p-PKA/PKA升高（P<0.05,P<0.01）,肺组织VIP表达升高（P<0.05,P<0.01）。结论 肺肠合治法能减轻急性肺损伤造成的肺组织水肿,其机制可能通过激活VIP/cAMP/PKA信号通路,进而促进水通道蛋白AQP1、AQP5的表达,增强肺组织的水液代谢有关。

Mechanism of Combined Therapy of Lung and Intestine in Alleviating Pulmonary Edema in Treatment of Acute Lung Injury Based on VIP/cAMP/PKA/AQPs Signaling Pathway