防己黄芪消肿方调控滑膜巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎滑膜炎

目的 观察防己黄芪消肿方（FHDP）对Hulth法膝骨关节炎（KOA）大鼠关节滑膜巨噬细胞极化情况及滑膜炎情况的干预作用。方法 36只大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、FHDP高、中、低剂量组（29.16、14.58、7.29 g·kg^-1）及洛索洛芬钠组（16.2 mg·kg^-1）。采用改良Hulth法造KOA大鼠模型。术后6周根据分组给予高、中、低3个剂量的FHDP药液、生理盐水（NS）及洛索洛芬钠药液进行干预,给药2周后处死动物。苏木素-伊红（HE）染色后观察滑膜及软骨的组织病理学改变,流式细胞术（FCM）及免疫荧光（IF）评估M1/M2巨噬细胞极化情况,分别采用免疫组织化学（IHC）及酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测关节组织和血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）、金属基质蛋白酶-13（MMP-13）等巨噬细胞极化相关蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组Krenn及Mankin评分显著增高（P<0.01）;与模型组比较,各给药组均能降低Krenn评分（P<0.05,P<0.01）,Mankin评分差异无统计学意义。与假手术组比较,模型组M1/m?（CD38⁺）显著升高（P<0.01）,M2/m?（CD206⁺）降低（P<0.05）;与模型组比较,FHDP高、中、低剂量组可降低M1/m?（P<0.05,P<0.01）,各给药组均提高M2/m?,但差异无统计学意义。与假手术组比较,模型组M1/M2显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各FHDP剂量组M1/M2均显著降低（P<0.01）,FHDP高、中剂量组较洛索洛芬钠组M1/M2更低（P<0.05）。与假手术组比较,模型组滑膜及软骨中TNF-α、IL-1β、MMP-13的水平显著增高（P<0.01）,IL-10的水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,各给药组均能降低滑膜中TNF-α、IL-1β水平（P<0.05）,对滑膜中MMP-13及IL-10的水平影响差异无统计学意义,各给药组均未能影响软骨中各炎症介质的水平。与假手术组比较,模型组血清TNF-α、IL-β水平显著升高（P<0.01）,IL-10水平降低（P<0.05）;与模型组比较,FHDP高剂量组可降低TNF-α水平（P<0.05）,各给药组均能升高IL-10水平（P<0.05,P<0.01）,各给药组IL-β的水平差异无统计学意义。结论 防己黄芪消肿方可改善KOA大鼠关节滑膜炎,可通过抑制M1巨噬细胞极化影响促炎细胞因子及金属基质蛋白酶的分泌,对M2巨噬细胞极化无明显影响作用,调控巨噬细胞极化失衡是该方缓解滑膜炎症治疗KOA的可能机制。

Fangji Huangqi Detumescence Prescription Treats Synovitis in Rats with Knee Osteoarthritis by Modulating Polarization of Synovial Macrophages