基于Wnt/β-catenin信号通路探讨槲皮素对自身免疫性葡萄膜炎大鼠的影响机制

目的 探讨槲皮素调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的影响机制。方法 运用网络药理学技术对槲皮素与EAU的调控作用关系进行初步判定；通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）与临床分级评分对模型进行鉴定，再通过ELISA对信号通路中重要炎性因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α进行检测，通过分子对接技术对通路中重要靶点因子进行结合验证，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测信号通路下相关靶点蛋白的表达水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测信号通路下相关靶点基因的表达水平。结果 通过ELISA与临床分级评分模型制作成功，ELISA检测信号通路中重要炎性因子IL-6、TNF-α，显示模型组、二甲基亚砜（DMSO）组二者表达最高，槲皮素低剂量和槲皮素高剂量组干预后均降低，趋势相同；分子对接显示槲皮素与β-catenin；低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）对接结合能十分理想；Western blot检测β-catenin、LRP6，模型组表达最高，随着不同剂量的槲皮素使用表达降低，二者趋势相同，槲皮素低剂量与槲皮素高剂量组比较差异无统计学意义；Real-time PCR结果显示β-catenin、MYC、AXIN2和TCF均为模型组表达最高，槲皮素高剂量组最低，槲皮素低剂量组降低表达，槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组之间比较差异无统计学意义。结论 槲皮素通过调控Wnt/β-catenin信号通路可降低EAU疾病的炎性表达，减轻患者的病痛。