多伞阿魏的冰冻切片方法建立及挥发油、香豆素类成分组织化学定位分析

目的 建立多伞阿魏的冰冻切片方法，并对其不同器官中挥发油和香豆素类成分进行组织化学定位研究。方法 以多伞阿魏根、茎、叶柄、叶为材料，考察蔗糖保护剂质量分数、液氮速冻时间、包埋条件、切片厚度、冷冻温度和时间、后处理方式等影响因素，对比冰冻切片的完整度、显微效果、伸卷度和清晰度，进而筛选最佳切片条件。分别利用苏丹Ⅳ染色法和荧光显微镜技术定位多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分。结果 多伞阿魏根、茎、叶柄、叶冰冻切片的最佳条件为根以质量分数10%、15%、20%梯度蔗糖作为保护剂；茎和叶柄以质量分数10%、20%、30%梯度蔗糖作为保护剂；叶以质量分数20%、25%、30%梯度蔗糖作为保护剂；以胶水-水（2∶1）作为包埋剂；液氮速冻20 s，-25 ℃回温30 min；-20 ℃下切片，切片厚度25 μm；贴片后用相同质量分数的蔗糖溶液冲洗，将切片在冰袋上静置一段时间，于常温条件下保存，其中蔗糖保护剂质量分数是最主要的影响因素。组织化学定位结果显示，多伞阿魏4种器官中挥发油和香豆素类成分均主要分布于树脂道。结论 该研究首次建立了多伞阿魏冰冻切片方法，该方法成片率高、步骤相对简化；多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分主要积累在树脂道中。

Establishment of Cryosectioning Method and Histochemical Localization Analysis of Volatile Oil and Coumarin Components of Ferula ferulaeoides