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高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库的建立
引用本文:侯力,唐建武,崔晓楠,王波,宋波,孙雷.高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库的建立[J].中华肿瘤防治杂志,2006,13(1):11-14.
作者姓名:侯力  唐建武  崔晓楠  王波  宋波  孙雷
作者单位:大连医科大学病理学教研室,辽宁,大连,116027
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371583)
摘    要:目的:以抑制性消减杂交技术分离高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞HcaF和HcaP间差异表达的基因。方法:采用抑制性消减杂交技术,以高低转移力小鼠肝癌细胞HcaF为检测子,以低转移力HcaP细胞为驱赶子,分离高转移力癌细胞中高表达的基因的cDNA片段。将差异表达基因的cDNA片段插入T/A克隆载体,并通过热转化的方法转化大肠埃希菌DH5α,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库。以菌液PCR的方法检测随机挑选的白色菌落中插入片段的出现频率。提取14个重组质粒进行序列分析。结果:在消减文库中共获800个白色菌落,对随机挑选的160个白色菌落进行菌液PCR扩增,发现95%的白色菌落中含有100~700bp的插入片段。对重组质粒的序列分析和同源性比对发现,所获的14个序列中3个为已知基因,分别来自小鼠热休克蛋白、ribosomalproteinS13、ethanolinduced6基因;4个可能来源于新基因;3个与3个不同的EST同源。结论:成功构建了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库,为今后高通量筛选癌淋巴道转移相关基因,奠定了坚实的基础。

关 键 词:肝肿瘤  试验性/病理学  肿瘤转移  癌基因  杂交
文章编号:1673-5269(2006)01-0011-04
修稿时间:2004年4月15日

Construction of subtracted cDNA library of mouse hepatocarcinoma cell lines with different lymphatic metastasis potential
HOU Li,TANG Jian-wu,CUI Xiao-nan,WANG Bo,SONG Bo,SUN Lei.Construction of subtracted cDNA library of mouse hepatocarcinoma cell lines with different lymphatic metastasis potential[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2006,13(1):11-14.
Authors:HOU Li  TANG Jian-wu  CUI Xiao-nan  WANG Bo  SONG Bo  SUN Lei
Abstract:
Keywords:liver neoplasms  experimental/pathology  neoplasm metastasis  suppression subtractive hybridization
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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