| 氨基末端B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体的构建及纯化 |
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| 引用本文： | 李卫鹏,郑佐娅,王红,王从珠,杭勤,赵卫国. 氨基末端B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体的构建及纯化[J]. 检验医学, 2005, 20(5): 405-408 |
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| 作者姓名： | 李卫鹏 郑佐娅 王红 王从珠 杭勤 赵卫国 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023;上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023;上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023;上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023;上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023;上海第二医科大学上海市医学检验重点试验室,上海,200023 |
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| 摘 要： | 目的 克隆人氨基末端B型钠尿肽（NT-proBNP）基因,构建原核表达载体并纯化其表达蛋白.方法 用聚合酶链反应（PCR）从正常成人cDNA库中扩增出人NT-proBNP基因,将其克隆进pUCm-T中测定核苷酸序列.构建大肠杆菌分泌性表达载体pGEX-4T-3-NT-proBNP,IPTG诱导表达,GSH-agarose亲和纯化该表达蛋白.结果经PCR扩增成功获得228 bp的NT-proBNP基因,测序正确,在大肠埃希菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的23%,用SDS-PAGE和Western blot鉴定大肠埃希菌中的表达产物,显示其相对分子质量为34 600.经亲和纯化后的GST-NT-proBNP的纯度可以达到95%,得率为1.7 mg/100 ml.结论 NT-proBNP基因的克隆、表达和纯化成功,为建立NT-proBNP检测方法奠定了基础.
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| 关 键 词： | 氨基末端B型钠尿肽 克隆 构建 纯化 |
| 文章编号： | 1001-2087（2005）05-0405-04 |
| 收稿时间： | 2004-12-16 |
| 修稿时间： | 2004-12-16 |
Cloning, construction and purification of recombinant human amino-terminal pro-B type natriuretic peptide |
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| LI Weipeng,ZHENG Zuoya,WANG Hong,WANG Congzhu,HANG Qin,ZHAO Weiguo. Cloning, construction and purification of recombinant human amino-terminal pro-B type natriuretic peptide[J]. Laboratory Medicine, 2005, 20(5): 405-408 |
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| Authors: | LI Weipeng ZHENG Zuoya WANG Hong WANG Congzhu HANG Qin ZHAO Weiguo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Amino-terminal pro-B type natriuretic peptide Cloning Construction Purification |
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