| 摘 要： | 目的研究氧化应激状态下维生素C作为抗氧化剂对视网膜色素上皮细胞的保护作用。方法外源性过氧化氢(H_2O_2)梯度浓度为0、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、250μmol/L作用于ARPE-19细胞,观察细胞形态变化。MTT方法检测细胞活力,2'7'-二氯荧光乙酰乙酸钠(DCFH-DA)荧光探针检测12 h或24 h细胞内活性氧(ROS)的生成,确定H_2O_2的适合作用浓度(100μmol/L)。梯度浓度(0、20μmol/L、100μmol/L、500μmol/L)的维生素C作用于氧化应激下的ARPE-19细胞,检测细胞存活率、细胞凋亡和细胞内ROS的改变。结果外源性H_2O_2作用下,ARPE-19细胞生存力下降且呈剂量依赖性及时间依赖性,同时ARPE-19细胞内ROS水平上升,提示H_2O_2处理后可诱导ARPE-19细胞的氧化应激损伤。考虑到人体自然状态下,RPE所受到的氧化应激损伤是低强度、长时间的累积效应,所以H_2O_2的适合作用浓度确定为100μmol/L。维生素C处理后,中等浓度(100μmol/L)的维生素C显著提高了ARPE-19细胞氧化应激下的生存率,同时显著降低细胞内ROS水平以及细胞凋亡率。而低浓度和高浓度的维生素C无此作用。结论外源性H_2O_2可诱导人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞发生氧化应激反应,导致细胞损伤。适当浓度的维生素C可降低细胞内氧化应激水平,减少ARPE-19细胞损伤及凋亡,起到抗氧化损伤的保护作用。
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