牙髓干细胞对皮肤成纤维细胞衰老及增殖能力的影响

目的：研究牙髓干细胞对皮肤成纤维细胞衰老及增殖能力的影响,并初步探讨其机制。方法：从人牙髓中提取,培养牙髓干细胞,与皮肤成纤维细胞分组共培养,分为3组：对照组（单纯皮肤成纤维细胞培养）、条件培养基组（利用牙髓干细胞条件培养基培养成纤维细胞）、直接共培养组（采用Transwell共培养小室）。共培养后,进行 β半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色,检测成纤维细胞的衰老情况;利用 CCK-8 法检测各组成纤维细胞的活性;流式细胞仪分析成纤维细胞的细胞周期变化;采用RT-PCR和 Western免疫印迹检测各组成纤维细胞衰老相关蛋白 p21、p53以及pRb 的mRNA和蛋白表达水平。采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果：与空白组相比,后2组的皮肤成纤维细胞表达β半乳糖苷酶降低、增殖能力增强、G1期细胞减少而S期和G2期增多, p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低而PRb表达升高。结论：牙髓干细胞及其条件培养基具有抗皮肤成纤维细胞衰老的作用,为牙髓干细胞在抗皮肤衰老方面的临床应用提供了依据。