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清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1、PDL1蛋白表达的影响
作者姓名:朱华贺  朱烨琳  单聪  李乐佳  赵玟忆  胡嘉旖  汪顺  杨爱东
作者单位:上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203;上海中医药大学基础医学院 上海201203
基金项目:国家重点研发计划项目(2018YFC1704102);国家自然科学基金面上项目(81673855);上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划项目;上海中医药大学中医临床基础学科项目(A1-Z20-302-0106);上海中医药大学第十二批大学生科创项目(2019SHUTCM028)
摘    要:  目的:研究清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、程序性细胞死亡受体1(PD1)及其配体(PDL1)蛋白表达的影响。  方法:雄性Wistar大鼠一次性腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。取造模成功的大鼠,随机分为模型组、二甲双胍(100 mg/kg)组及中药低剂量(清利健脾补肾方药液,4.5 g/kg)、高剂量(清利健脾补肾方药液,18 g/kg)组,每组8只。另设8只大鼠为正常组。各组灌胃给予相应药物,连续28 d。干预期间,测量各组大鼠血糖水平。末次给药后,收集大鼠的肾脏和膀胱组织;HE染色后光镜下观察大鼠肾脏和膀胱组织形态学变化;Western blot分别检测大鼠肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达。  结果:①干预第14天,二甲双胍组和中药高剂量组大鼠血糖水平较模型组明显降低(P<0.05);干预第28天,二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的血糖水平较模型组均显著降低(P<0.05,P<0.01),且中药高剂量组血糖水平明显低于低剂量组(P<0.05)。②模型组大鼠可见肾小管上皮细胞肿胀和坏死,局部肾小管扩张,肾小球上皮细胞增生;膀胱平滑肌肌细胞肥大,出现间质黏液样变性,且排列紊乱。二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的病变程度明显减轻。③模型组大鼠肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达较正常组显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组和中药低、高剂量组肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组PD1蛋白表达亦显著降低(P<0.05),且中药高剂量组PD1蛋白表达较二甲双胍组和中药低剂量组显著降低(P<0.05)。④模型组大鼠膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平较正常组均明显升高(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组和中药高剂量组膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组TGF-β、α-SMA和PD1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且中药高剂量组PDL1蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.05)。  结论:清利健脾补肾方可降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖水平,减轻肾脏和膀胱组织病理损伤,其作用机制可能与下调肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA以及膀胱组织PD1、PDL1的蛋白表达水平有关。

关 键 词:清利健脾补肾方  糖尿病  TGF-β  α-SMA  PD1/PDL1  大鼠
收稿时间:2020-05-25
修稿时间:2020-07-09
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