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人源分子佐剂hC3d3促进人免疫活性细胞协同刺激分子表达及对hCGβ抗原的反应性
引用本文:李华萍,李大金,朱影,袁敏敏.人源分子佐剂hC3d3促进人免疫活性细胞协同刺激分子表达及对hCGβ抗原的反应性[J].中华微生物学和免疫学杂志,2006,26(12):1023-1027.
作者姓名:李华萍  李大金  朱影  袁敏敏
作者单位:1. 200233,上海交通大学附属第六人民医院
2. 200011,上海,复旦大学上海医学院附属妇产科医院暨妇产科研究所;海南医学院附属医院
3. 200011,上海,复旦大学上海医学院附属妇产科医院暨妇产科研究所
基金项目:上海市自然科学基金(00ZB14058);国家自然科学基金(30271235)
摘    要:目的探讨分子佐剂hC3d3与hCGβ的融合蛋白hCGβ-hC3d3对人外周血单个核细胞(PBMC)中的B细胞与T细胞表面协同刺激分子表达及对hCGβ抗原反应性的影响。方法从人肝细胞cDNA文库克隆hC3d基因片段;构建pCI-gs-signal-6His-hCGβ及pCI-gs-signal-6His-hCGβ-hC3d3真核表达质粒,表达和纯化重组蛋白抗原hCGβ及hCGβ-hC3d3融合蛋白。实验分组:将B细胞、B+T细胞组或PBMC,分别应用hCGβ、hCGβ-hC3d3或美洲商陆(PWM)等抗原进行体外处理48h。用流式细胞术分析培养后的上述淋巴细胞表面的CD80、CD86、CD154、CD25等协同刺激分子的表达;用ELISA检测培养上清中IL-2的含量。结果本研究成功克隆了hC3d基因,构建了真核表达质粒pCI-gs-signal-6His-hCGβ及pCI-gs-signal-6His-hCGβ-hC3d3;经转染CHO细胞,获得了目的蛋白高效分泌表达。经鉴定及纯化成功获得了较高纯度的目的蛋白hCGβ及hCGβ-hC3d3。hCGβ-hC3d3蛋白能够显著上调B细胞表面CD80、CD86分子的表达,尤其是CD86分子的表达(P〈0.01);能明显增强T细胞表面CD154、CD25分子的表达(P〈0.05)。hCGβ-hC3d3蛋白提高B细胞抗原提呈能力及T细胞活化后分泌IL-2的能力(P〈0.05)。结论人源分子佐剂hC3d3明显促进人免疫活性细胞协同刺激分子表达及对hCGβ抗原的反应性。

关 键 词:hCGβ  hC3d3  免疫活性细胞  协同刺激分子  白细胞介素2
收稿时间:2006-02-23
修稿时间:2006年2月23日

The molecular adjuvant hC3d3 improves expressions of co-stimulatory molecules in human immuno-competent cells and their responsiveness to the hCGβ antigen
LI Hua-ping,LI Da-jin,ZHU Ying,YUAN Min-min.The molecular adjuvant hC3d3 improves expressions of co-stimulatory molecules in human immuno-competent cells and their responsiveness to the hCGβ antigen[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2006,26(12):1023-1027.
Authors:LI Hua-ping  LI Da-jin  ZHU Ying  YUAN Min-min
Abstract:
Keywords:hC3d3
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