| 两种GAD65片段与IL-4基因共表达DNA疫苗的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 张松,周智广,周鹏程,孙意,黄干,张翼. 两种GAD65片段与IL-4基因共表达DNA疫苗的构建与鉴定[J]. 中华糖尿病杂志, 2008, 16(8) |
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| 作者姓名： | 张松 周智广 周鹏程 孙意 黄干 张翼 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所,中南大学糖尿病中心,长沙410011 |
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| 摘 要： | 目的构建两种谷氨酸脱羧酶（GAD）65片段与白细胞介素4（IL-4）基因共表达DNA疫苗,并在体外COS-7细胞中对表达产物进行检测。方法从GAD65质粒中扩增出GAD190～315和GAD490～570两个片段的cDNA,Overlap法分别与hIL-2信号肽cDNA基因拼接,将拼接后的融合基因与IL-4基因依次克隆入双启动子真核表达载体pBudCE4.1中。重组子经酶切和测序鉴定后,脂质体转染COS-7细胞,Western blot法检测融合基因的表达,ELISA法检测IL-4表达。结果核酸序列测定表明克隆的融合基因和IL-4基因序列与报告序列一致,开放阅读框正确,Western blot和ELISA显示在COS-7细胞中均可检测两个目的基因的表达。结论两种GAD65片段与IL-4共表达DNA疫苗均成功构建,为1型糖尿病的预防研究提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 谷氨酸脱羧酶65 白细胞介素4 克隆 DNA疫苗 糖尿病,1型 |
Construction and identification of co-expression DNA vaccine containing GAD65 fragment gene and IL-4 gene |
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| ZHOU Zhi-guang. Construction and identification of co-expression DNA vaccine containing GAD65 fragment gene and IL-4 gene[J]. CHINESE JOURNAL OF DIABETES MELLITUS, 2008, 16(8) |
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| Authors: | ZHOU Zhi-guang |
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