摘 要: | 目的:探讨尖叶假龙胆有效成分雏菊叶龙胆酮(BEL)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)表型转化的作用。方法:采用SD乳大鼠,利用胰蛋白酶联合Ⅱ型胶原酶消化法和差速贴壁法提取原代CFs,细胞经传代、纯化,行波形蛋白(Vimentin)鉴定,给予TGF-β1(5、10、20 ng/mL)刺激,倒置显微镜下观察细胞形态并拍照;给予10 ng/mL的TGF-β1刺激0、6、12、24、48、72 h, Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的表达;给予10 ng/mL的TGF-β1刺激24 h,细胞免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的变化;给予BEL预处理0.5 h,再用TGF-β1刺激24 h,采用细胞免疫荧光染色观察α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的改变。结果:提取的细胞经形态观察和Vimentin鉴定为CFs, 10 ng/mL的TGF-β1刺激CFs可显著诱导其表型转化;BEL预处理可抑制TG...
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