| 原癌基因Zbtb7A的POZ区在大肠杆菌中的表达及其多抗制备 |
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| 引用本文： | 季玉连,赵树立,黄亚红,赵光锋,侯亚义. 原癌基因Zbtb7A的POZ区在大肠杆菌中的表达及其多抗制备[J]. 医学研究生学报, 2009, 22(7): 687-691 |
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| 作者姓名： | 季玉连 赵树立 黄亚红 赵光锋 侯亚义 |
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| 作者单位： | 1. 南京大学医学院免疫与生殖生物实验室
2. 南京大学医学院免疫与生殖生物实验室南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏南京,210093 |
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| 摘 要： | 目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用.本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体. 方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表达载体pET-26b(+)中.重组表达质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),用0.5mmol IPTG诱导重组蛋白表达.所获重组表达蛋白经15%SDS-PAGE分离,切胶回收目的蛋白,研磨后免疫家兔制备抗血清.收集的抗血清经饱和硫酸铵沉淀和G蛋白柱联合纯化,用Western blot证实对纯化的抗血清进行鉴定.结果:获得了密码子优化后的Zbtb7A POZ区的编码序列,并成功地获得了其重组蛋白,制备了高纯度的抗POZ区多克隆抗体. 结论:所获得的重组POZ区蛋白及其多克隆抗体可应用于对Zbtb7A的进一步研究.
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| 关 键 词： | 原癌基因Zbtb7A POZ区 原核表达 多克隆抗体 |
Expression of the POZ domain of human Zbtb7A and preparation of its polyclonal antibodies |
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| JI Yu-lian,ZHAO Shu-li,HUANG Ya-hong,ZHAO Guang-feng,HOU Ya-yi. Expression of the POZ domain of human Zbtb7A and preparation of its polyclonal antibodies[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2009, 22(7): 687-691 |
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| Authors: | JI Yu-lian ZHAO Shu-li HUANG Ya-hong ZHAO Guang-feng HOU Ya-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pET-26b(+) |
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