应用A_(549)细胞分离到1株致细胞病变的甲型肝炎病毒

应用A_(540)细胞系从1例甲型肝炎(甲肝)患儿粪便标本中分离到1株致细胞病变(CPE)的甲型肝炎病毒(HAV),称BJ-1。用免疫荧光(IF)试验证明,约有50％细胞的胞浆内有甲型肝炎病毒抗原(HAAg)。用抗-HAV单克隆抗体和美国NIH的黑猩猩免疫血清鉴定,证明其抗原性与HAV相同。超薄切片电镜观察,证实病毒在胞浆内复制,呈晶格状排列,有空心和实心两种,为典型小RNA病毒。免疫电镜(IEM)检查,大量的27～30nm的病毒颗粒和甲肝患者恢复期血清及黑猩猩抗-HAV血清凝集成抗原抗体复合物。BJ-1HAAg最初检出时间为34天,随着传代次数的增加,感染滴度逐渐增高,繁殖周期逐渐缩短至2～3天。现已稳定地传至第19代,感染滴度TCID_(50)为10~-5/0.1ml。将含有BJ-1HAAg的A_(540)细胞片和羊抗人IgM(μ链)荧光抗体组合成IF(间接法)药盒,检测抗-HAV IgM抗体,与AbbottEIA HAVAB-M药盒比较,符合率为98.4％(246/250)。