前列腺素合成酶的酶组织化学反应和定量化探讨 |
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作者姓名: | 李枫 沈瑞莲 |
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作者单位: | 1. 北京医科高等学校, 2. 北京大学医学部组织学与胚胎学系, |
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摘 要: | 在组织切片上显示前列腺素合成酶的原理是该酶可催化底物花生四烯酸而氧化成前列腺素 ,反应中所形成的活泼氧原子又使 3,3′-二氨基联苯胺形成棕色沉淀 ,以间接证实前列腺素合成酶的存在。正常 Wistar大鼠和昆明小鼠 ,体重分别为 2 0 0 g和 2 0 g左右。取其肾和胃行 6 μm厚冰冻切片。用 Janszen显示法 :花生四烯酸 0 .4mg,DAB 2 mg,KCN 0 .6 5 mg和 0 .2 M Tris- HCl缓冲液 ( p H8.0 ) 1 0 ml,35℃孵育 3h。孵育后标本用蒸馏水洗 ,分别以甘油明胶和中性树胶封固。经 Leica Q5 0 0 MC图像分析仪进行平均灰度值 ( Mean Grey,MG)的测…
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