| pcDNA3.1(+)-LYVE-1真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 杜艳,杨婉薇,马展,杨翠霞,刘一文,何怡青,王颖智,高锋.pcDNA3.1(+)-LYVE-1真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达[J].医学分子生物学杂志,2010,7(6). |
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| 作者姓名： | 杜艳 杨婉薇 马展 杨翠霞 刘一文 何怡青 王颖智 高锋 |
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| 基金项目： | 上海市科学技术委员会医学重点项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1融合基因表达质粒,观察其在COS-7细胞中的表达,为进一步探讨该标志物在肿瘤淋巴转移中的作用提供工具.方法 从本院结肠癌根治术患者术所取组织中的淋巴结抽提总RNA,RT-PCR扩增LYVE-1基因片段,并将其插入pMD19-T Simple Vector进行测序,鉴定正确后构建pcDNA3.1(+)-LYVE-1并转染COS-7细胞,RT-PCR、Western印迹检测目的 蛋白表达,间接免疫荧光检测该基因表达在COS-7细胞上.结果 成功获取了人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1全长cDNA,构建了其真核表达载体pcDNA3.1(+)-LYVE-1,转染COS-7细胞后检测出目的 蛋白的表达,并且证明该基因表达在细胞上.结论 成功构建了pcDNA3.1(+)-LYVE-1重组质粒,为进一步研究LYVE-1在肿瘤淋巴管转移中的功能提供了重要的实验材料.
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| 关 键 词： | 透明质酸受体-1 质粒构建 非洲绿猴肾细胞 |
Construction of pcDNA3.1-LYVE-1 Recombinant Plasmid and Its Expression in COS-7 Cells |
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| DU Yan,YANG Wanwei,MA Zhan,YANG Cuixia,LIU Yiwen,HE Yiqing,WANG Yingzhi,GAO Feng.Construction of pcDNA3.1-LYVE-1 Recombinant Plasmid and Its Expression in COS-7 Cells[J].Journal of Medical Molecular Biology,2010,7(6). |
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| Authors: | DU Yan YANG Wanwei MA Zhan YANG Cuixia LIU Yiwen HE Yiqing WANG Yingzhi GAO Feng |
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