| 荧光定量聚合酶链反应检测临床痰液标本中军团菌 |
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| 引用本文： | 裘宇容,芮勇宇,耿穗娜,苏斌,胡朝晖,刘洋敏,宣瑞红,赵利伟,朱庆义. 荧光定量聚合酶链反应检测临床痰液标本中军团菌[J]. 国际检验医学杂志, 2010, 31(12). DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2010.12.011 |
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| 作者姓名： | 裘宇容 芮勇宇 耿穗娜 苏斌 胡朝晖 刘洋敏 宣瑞红 赵利伟 朱庆义 |
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| 作者单位： | 1. 南方医科大学南方医院检验科,广州,510515
2. 广州金域医学检验中心,510330 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项,国家标准化委员会 |
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| 摘 要： | 目的建立快速、特异、敏感的TaqMan探针荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法,用于检测军团菌16SRNA基因。方法军团菌标准菌株购自美国标准菌种收藏所,临床痰标本取自南方医科大学南方医院257例病原不明肺炎住院患者。提取菌种DNA及临床痰标本DNA,通过对标准菌株及临床痰液标本DNA分别进行待考核试剂与16SrRNAPCR检测及测序,验证待考核试剂方法的敏感性、特异性。结果荧光定量PCR检测灵敏度为10cfu/mL,比16SrRNA定性PCR检测灵敏度381cfu/mL高38倍。257例病原不明肺炎患者的临床痰标本细菌培养检出嗜肺军团菌血清型1型1例。待考核试剂和16SrRNAPCR方法检测阳性率分别为8.95(23/257)和8.95(23/257),其中2例不符合,1例待考核试剂阳性16SrRNAPCR方法阴性,另一例16SrRNAPCR方法阳性,待考核试剂阴性。二者总符合率为99.22(255/257),其中阳性符合率为95.65(22/23),阴性符合率为99.57(233/234)。结论待考核试剂荧光定量PCR检测军团菌标准菌种敏感性强,特异性好,用于临床痰标本军团菌检测时假阳性率为4.35,与16SrRNAPCR方法及测序比较具有较好的符合性和等效性。
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| 关 键 词： | 军团病杆菌属 基因,rRNA 聚合酶链反应 痰 |
Detection of Legionella in clinical sputum specimens by quantitative fluorescence-PCR |
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