| PEX慢病毒载体构建及其在293FT细胞中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 赵中松,赵敬湘,张韶峰,王字玲,唐红卫,李锦毅.PEX慢病毒载体构建及其在293FT细胞中的分泌表达[J].医学分子生物学杂志,2010,7(6). |
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| 作者姓名： | 赵中松 赵敬湘 张韶峰 王字玲 唐红卫 李锦毅 |
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| 摘 要： | 目的 构建含人MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒,并在293FT细胞中分泌表达PEX蛋白.方法 利用RT-PCR、基因重组等技术,构建含MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒表达载体pBPLV-signal-PEX,在脂质体介导下与包装质粒(pLP1、pLP2)、包膜质粒(pLP/VSVG)共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并进行滴度测定.慢病毒感染2931;3"细胞后,Western印迹法检测293FI"细胞培养上清中PEX的表达.结果 酶切和DNA测序表明慢病毒表达载pBPLV-signal-PEX构建正确,四质粒共转染293FT细胞成功获得慢病毒;慢病毒感染293FT细胞后,在细胞培养卜清中可检测到PEX蛋白的表达.结论 成功构建了含人PEX的重组慢病毒,在体外有效感染293fT细胞并持续分泌表达目的 蛋白,为进一步研究PEX在肿瘤侵袭与转移中的作用提供实验基础.
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| 关 键 词： | PEX基因 信号肽 慢病毒载体 293FT细胞 |
Construction of and Expression Lentiviral Vector Carrying PEX Gene |
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| ZHAO Zhongsong,ZHAO Jingxiang,ZHANG Shaofeng,WANG Ziling,TANG Hongwei,LI Jinyi.Construction of and Expression Lentiviral Vector Carrying PEX Gene[J].Journal of Medical Molecular Biology,2010,7(6). |
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| Authors: | ZHAO Zhongsong ZHAO Jingxiang ZHANG Shaofeng WANG Ziling TANG Hongwei LI Jinyi |
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