姜黄素激活转录因子Nrf2对人肝细胞氧化应激的影响

目的 观察姜黄素对人肝细胞系L02中细胞转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)核转位及细胞氧化应激水平的影响.方法 用15μmol/L和30 μmol/L姜黄素干预102细胞,用RPMI1640培养作为对照,干预6 h和12 h,间接免疫荧光法观察核转位水平;将人肝细胞102分成对照组、模型组、干预组三组,对照组正常培养未给予葡萄糖氧化酶(GO)和姜黄素干预,模型组仅加入100U/L GO干预2 h,制备细胞氧化应激模型,干预组加入最佳浓度的姜黄素干预12 h,然后给予100 U/L GO干预2 h.免疫荧光法观察102细胞Nrf2核转位情况,分光光度法检测细胞MDA、GSH水平,速率法检测细胞培养液AST和ALT的水平,流式细胞术检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)水平的变化.结果 姜黄素能够诱导Nrf2的核转位,其中30 μmol/L的作用优于15μmol/L,各浓度时12 h作用优于6 h.模型组MDA、AST、ALT较对照组显著升高(P<0.01),干预组MDA、AST、ALT较模型组显著降低(P<0.01),模型组GSH较对照组显著降低(P<0.01),干预组GSH较模型组显著升高(P<0.01).模型组ROS阳性细胞荧光强度较对照组显著升高(P<0.01),干预组阳性细胞水平较模型组显著降低(P<0.01).结论 姜黄素通过促进肝细胞102的Nrf2核转位,降低细胞内活性氧的水平,进而减轻细胞氧化应激损伤.

Effect of curcumine on intracellar ROS in cultured human hepatocyte by upregulating the activity of Nrf2