| 摘 要： | 目的通过观察辛伐他汀对钛颗粒刺激人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)而释放TNF-α及单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein1,MCP-1)的影响,分析该过程中p42/p44激酶磷酸化的情况,评价辛伐他汀在防治人工关节无菌性松动中的作用。方法取成年健康志愿者外周血45mL,分层梯度离心法分离获得PBMC,制成密度为5×108个/mL的细胞悬液,根据培养液不同分成5组。A组:加入3mL RPMI-1640培养液及1mL0.01%钛颗粒悬液;B、C、D、E组:同A组试剂外,分别加入2mL浓度为1×10-5、1×10-6、1×10-7mmol/L辛伐他汀和20μmol/L U0126。取培养24h后上清液检测TNF-α及MCP-1含量。取培养2h后PBMC,按A～E组分组方法分别用不同培养液预处理60min,钛颗粒分别刺激培养30、60min,采用Western blot检测细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK1/2)的表达水平。结果A、B、C、D、E组TNF-α含量分别为1.1155±0.2436、0.6936±0.3543、0.6957±0.3873、0.7164±0.4789、0.2635±0.1016;MCP-1分别为1.4210±0.1053、0.9151±0.4113、1.0035±0.4642、1.1020±0.3539、0.2713±0.1451。A组TNF-α及MCP-1含量明显高于其他组,差异有统计学意义(P0.05);E组与B、C、D组比较差异有统计学意义(P0.05),B组与C、D组比较差异有统计学意义(P0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。Western blot检测显示钛颗粒刺激培养30、60min各组均见ERK1/2表达;刺激培养30min时A、B、C、D、E组ERK1/2含量较低;60min时A、B、C、D、E组ERK1/2含量分别为1.6121±0.0682、1.0781±0.0728、1.2687±0.2231、1.4397±0.1801、0.7320±0.1104,组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论ERK1/2通路是磨屑诱导巨噬细胞生成TNF-α和MCP-1的主要通路,辛伐他汀可抑制此通路,进而有效防止关节磨屑诱导的人工关节松动。
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