| 兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察 |
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| 引用本文： | 周强,李起鸿,许建中,石国华.兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察[J].第三军医大学学报,2005,27(16):1667-1670. |
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| 作者姓名： | 周强 李起鸿 许建中 石国华 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院骨科,全军矫形外科中心,重庆,400038;第三军医大学西南医院骨科,全军矫形外科中心,重庆,400038;第三军医大学西南医院骨科,全军矫形外科中心,重庆,400038;第三军医大学西南医院骨科,全军矫形外科中心,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，西南医院科技创新项目 |
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| 摘 要： | 目的观察三步酶消化法分离兔原代肋软骨细胞的效果和收获效率,并观察其体外传代培养的生物学特性.方法三步酶消化法设计为以培养液配制的1g/L胰蛋白酶/1g/L EDTA、1g/L透明质酸酶和2g/LⅠ型胶原酶顺序消化肋软骨分离细胞,检测细胞收获效率和存活率;体外传代培养观察细胞形态、生长及胞外基质中Ⅰ型和Ⅱ型胶原、蛋白多糖聚集体等的变化.结果①肋软骨经三步酶消化软骨基质逐步解离和降解,细胞被完全分离,每克软骨的细胞收获量平均为4 295.7×104个细胞,细胞存活率平均为97.2%.②原代和第1代细胞附壁生长呈三角形或多角形,生长融合时呈卵圆形,Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝异染反应均呈阳性,原代细胞外基质有高的硫酸糖胺多糖含量为(80.61±11.40)μg/cm2;第3代后细胞逐渐变为梭形,Ⅱ型胶原免疫组化为阴性,甲苯胺蓝异染反应亦明显减弱,第4代细胞外基质的硫酸糖胺多糖含量为(44.74±10.18)μg/cm2.结论①三步酶消化法能完全消化降解肋软骨基质,使细胞完全分离,并具有高细胞收获率和高细胞存活率.②原代和第1代肋软骨细胞具有良好的生物学活性.
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| 关 键 词： | 肋软骨 细胞分离 软骨细胞 组织工程 |
| 文章编号： | 1000-5404(2005)16-1667-04 |
| 收稿时间： | 2005-01-30 |
| 修稿时间： | 2005-06-24 |
Isolation of chondrocytes from rabbit rib cartilage with three-step enzymatic digestion and their biological characteristic in vitro |
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| ZHOU Qiang,LI Qi-hong,XU Jian-zhong,SHI Guo-hua.Isolation of chondrocytes from rabbit rib cartilage with three-step enzymatic digestion and their biological characteristic in vitro[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2005,27(16):1667-1670. |
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| Authors: | ZHOU Qiang LI Qi-hong XU Jian-zhong SHI Guo-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rib cartilage cell separation chondrocytes tissue engineering |
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