格列苯脲通过激活ROS-JNK通路发挥抗肿瘤作用

目的：探讨ATP敏感性钾通道（KATP）阻断剂格列本脲对胃癌细胞株MGC-803的抗肿瘤作用及相关机制。方法：应用MTT、Hoechst法分别检测格列本脲对细胞活力和凋亡的影响：应用Western．blot、RT-PCR等方法检测MGC-803细胞KATP亚基的表达、线粒体细胞色素C和凋亡诱导因子（AIF）的释放、JNK，Akt的磷酸化，以及NADPH氧化酶催化亚基gp91的表达；应用H2DCFDAROS荧光探针检测ROS和O2-的产生，氧电极法测定线粒体呼吸功能。结果：MGC-803细胞表达由kir6．2和SUR1亚基构成的KATP通道。格列苯脲可降低MGC-803细胞活力、促进其凋亡；格列苯脲能促进NADPH氧化酶源性和线粒体源性ROS的生成，进而活化JNK激酶，并降低线粒体膜电位、促进细胞色素C和凋亡诱导因子（AIF）的释放，触发线粒体通路介导的细胞凋亡；抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）可抑制格列苯脲降低MGC-803细胞活力、诱发细胞凋亡，以及活化JNK的作用；进一步的研究显示，格列苯脲可显著降低野生型MEF细胞的活力、促进其凋亡，并能抑制抗凋亡的Akt信号通路，但不影响JNK1和JNK2-MEF细胞的存活。结论：KATP，通道阻断剂格列苯脲可通过促进ROS的生成，激活JNK、抑制Akt信号通路，触发线粒体通路介导的细胞凋亡，从而发挥其抗肿瘤作用。研究结果提示，KATP通道可能是发展抗肿瘤药物的有效靶标。