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白细胞介素31在E.coli中的表达及活性鉴定
引用本文:黄俊琼,余妍,杜联锋,宋明英,肖美艳,孙万邦.白细胞介素31在E.coli中的表达及活性鉴定[J].遵义医学院学报,2007,30(4):452-455.
作者姓名:黄俊琼  余妍  杜联锋  宋明英  肖美艳  孙万邦
作者单位:1. 遵义医学院附属医院,检验科,贵州,遵义,563003
2. 遵义医学院珠海校区免疫学教研室,广东,珠海,519041
摘    要:目的构建人IL-31原核表达载体,在大肠杆菌中表达,研究人IL-31对人表皮角化细胞分泌趋化因子MIP-3β的活性影响。方法大量培养pET28a(+)-hIL-31工程菌株,提取质粒,BamHI、HindⅢ双酶切,并将其连接到原核表达载体pET32a(+),通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达。用RT-PCR检测该目的蛋白对人表皮角化细胞HaCaT表达趋化因子MIP-3β的影响。结果原核表达质粒pET32a(+)-hIL-31构建正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,序列正确,IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中大量表达,纯化后的目的蛋白可刺激人表皮角化细胞表达MIP-3β。结论原核表达质粒pET32a(+)-hIL-31构建正确,纯化后的蛋白具有生物学活性,可刺激人表皮角化细胞表达趋化因子MIP-3β,为研究人IL-31的作用及其作用机制和制备单克隆抗体奠定了基础。

关 键 词:人IL-31  表达  趋化因子
文章编号:1000-2715(2007)04-0452-04
收稿时间:2007-08-05
修稿时间:2007年8月5日

Expression of human IL-31 in E.coli and identification of its activity
HUANG Jun-qiong,YU Yan,DU Lian-Feng,SONG Ming-ying,XIAO Mei-yan,SHUN Wan-bang.Expression of human IL-31 in E.coli and identification of its activity[J].Acta Academiae Medicine Zunyi,2007,30(4):452-455.
Authors:HUANG Jun-qiong  YU Yan  DU Lian-Feng  SONG Ming-ying  XIAO Mei-yan  SHUN Wan-bang
Abstract:
Keywords:E  coli
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