| WT1基因增强子构建位点对WT1基因启动子转录活性的影响 |
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| 引用本文： | 胡绍燕,陈子兴,顾伟英,赵晔,岑建农,傅铮铮,何军,谷敏. WT1基因增强子构建位点对WT1基因启动子转录活性的影响[J]. 中国病理生理杂志, 2008, 24(2): 209-214. DOI: 1000-4718 |
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| 作者姓名： | 胡绍燕 陈子兴 顾伟英 赵晔 岑建农 傅铮铮 何军 谷敏 |
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| 作者单位： | 1苏州大学附属儿童医院, 江苏 苏州 215003；2苏州大学附属第一医院， 江苏省血液研究所， 江苏 苏州 215006；
3苏州大学附属第三医院， 江苏 常州 213002 |
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| 摘 要： | 目的：以WT1基因启动子和增强子的功能片段为研究对象，探讨增强子构建在质粒的不同位点对基因启动子转录活性的影响。方法: 利用基因重组技术将WT1基因增强子的功能片段分别插入在已含有WT1基因启动子的质粒，pEWP的不同位点（MCS中的BamH I、EGFP 终止密码后的Not I和SV40polyA位点后的AflⅡ）中，将重组质粒转染慢粒白血病红白急变细胞株K562细胞、乳腺癌细胞株MCF-7细胞和人类胚胎肾转化细胞株293细胞，通过检测转基因细胞中EGFP的平均荧光强度来评估增强子对启动子的转录促进作用。结果: 通过基因重组技术分别构建了含有WT1基因启动子的载体，即pEWP，和含有WT1基因启动子和增强子的载体，即pEWPE、pEWPD和pEWPA。流式细胞仪检测EGFP的平均荧光强度，发现pEWPA在293细胞和K562细胞中能够增强WT1启动子的转录活性，而pEWPE和pEWPD则无增强作用。3者均不能在MCF7细胞中增强WT1启动子的转录活性。结论: SV40polyA位点后插入增强子能够有效地增强启动子的转录活性，且具有细胞特异性。
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| 关 键 词： | 启动子 WT1基因 增强子 WT1基因 |
| 文章编号： | 1000-4718（2008）02-0209-06 |
| 收稿时间： | 2006-07-26 |
| 修稿时间： | 2007-01-10 |
Influence of inserted site of WT1 enhancer on the transcriptional activity of WT1 promoter in the plasmid |
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| HU Shao-yan,CHEN Zi-xing,GU Wei-ying,ZHAO Ye,CEN Jian-nong,FU Zheng-zheng,HE Jun,GU Min. Influence of inserted site of WT1 enhancer on the transcriptional activity of WT1 promoter in the plasmid[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2008, 24(2): 209-214. DOI: 1000-4718 |
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| Authors: | HU Shao-yan CHEN Zi-xing GU Wei-ying ZHAO Ye CEN Jian-nong FU Zheng-zheng HE Jun GU Min |
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| Affiliation: | 1The Childrens Hospital of Soochow University, Suzhou 215003, China; 2The First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, China; 3The Third Affiliated Hospital of Soochow University, Changzhou 213002, China. E-mail:hsy139@sohu.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Promoter Wilms tumor gene Enhancer Wilms tumor gene Inserted site |
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