| 大肠埃希菌V1型分泌系统相关蛋白多克隆抗体制备及分泌蛋白检测 |
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| 引用本文： | 施潇磊,陈小溪,金锐,李浩,薛佩,姚玉峰,陶晶. 大肠埃希菌V1型分泌系统相关蛋白多克隆抗体制备及分泌蛋白检测[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2011, 31(1): 118. DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.01.028 |
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| 作者姓名： | 施潇磊 陈小溪 金锐 李浩 薛佩 姚玉峰 陶晶 |
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| 作者单位： | 1.上海交通大学 基础医学院病原生物学教研室 病原细菌学研究室, 上海 200025；2.上海交通大学2006级临床医学八年制, 上海 200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30870100） |
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| 摘 要： | 目的 为研究新近发现的大肠埃希菌（E. coli）Ⅵ型分泌系统的组成和功能，制备与之相关的三种重要蛋白AaiC、CRP和OmpA的多克隆抗体，并对分泌蛋白AaiC进行检测。方法 采用PCR技术扩增出目的基因，并将其连接到pET-22b或pQE80原核表达载体中，酶切及测序鉴定正确后转化E. coli BL21（DE3），经IPTG诱导表达蛋白并纯化，使用纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并用Western blotting检测抗体。应用AaiC抗体检测E. coli RS218菌株分泌蛋白。结果 重组质粒构建成功，并能够在E. coli中高效表达，免疫得到AaiC、CRP和OmpA高效价的特异性多克隆抗体。AaiC抗体检测证实RS218菌株能够分泌AaiC蛋白。结论 成功制备了E. coli三种重要蛋白AaiC、CRP和OmpA的特异性抗体，检测出RS218菌株分泌AaiC蛋白，为进一步研究E. coli Ⅵ型分泌系统的生物学功能以及E. coli的致病机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 大肠埃希菌 Ⅵ型分泌系统 多克隆抗体 分泌蛋白 |
Preparation of polyclonal antibodies of Escherichia coli type VI secretion system related proteins and detection of secreted proteins |
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| SHI Xiao-lei,CHEN Xiao-xi,JIN Rui,LI Hao,XUE Pei,YAO Yu-feng,TAO Jing. Preparation of polyclonal antibodies of Escherichia coli type VI secretion system related proteins and detection of secreted proteins[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2011, 31(1): 118. DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.01.028 |
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| Authors: | SHI Xiao-lei CHEN Xiao-xi JIN Rui LI Hao XUE Pei YAO Yu-feng TAO Jing |
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| Affiliation: | 1.Department of Medical Microbiology and Parasitology, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, 2.Grade 2006, Department of The Eight-year Program of Clinical Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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