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RON基因反义核酸真核表达载体的构建及其对A549的体外作用
引用本文:潘铁成,徐利军,李军,赵金平,陈涛,魏翔.RON基因反义核酸真核表达载体的构建及其对A549的体外作用[J].中华老年多器官疾病杂志,2004,3(4):283-288.
作者姓名:潘铁成  徐利军  李军  赵金平  陈涛  魏翔
作者单位:430030,武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院胸心外科
摘    要:目的肺癌的发生是多因素作用的结果,RON基因参与其中,但它在肺癌的基因治疗中意义尚不明确.本研究旨在探讨RON能否作为肺癌的基因治疗靶点及针对该基因跨膜区段(RONm)反义核酸对肺癌细胞的生物学功能的影响.方法从人肺鳞癌细胞提取总RNA进行RT-PCR、T载体克隆和测序,获得RON基因的跨膜区段,并将其反向插入真核表达载体中,转染肺癌细胞,利用ELISA检测细胞模型RON基因表达后的蛋白水平,同时利用MTT和细胞记数方法监测细胞的生物学活性的变化.结果用RT-PCR亚克隆RONm,测序结果与GenBank(X70040)一致.构建的RONm反义真核表达载体,转染后的肺癌细胞株A549 RON基因表达量和细胞活性明显降低.结论成功构建RONm反义核酸真核表达载体,RON能作为肺癌的基因治疗靶点;RONm反义核酸可有效抑制RON基因的表达阳性肺癌细胞的生长,为进一步研究将RONm反义核酸作为一种的肺癌基因治疗方法打下了分子生物学基础.

关 键 词:RON基因  受体酪氨酸激酶  核酸类  反义  肺癌A549  抑制
修稿时间:2004年8月26日

Construction of the antisense nucleic acid eukaryotic expressing vector of the RON gene and its effect on lung cancer cell line A549 in vitro
PAN Tiecheng,XU Lijun,LI Jun,et al.Construction of the antisense nucleic acid eukaryotic expressing vector of the RON gene and its effect on lung cancer cell line A549 in vitro[J].Chinrse journal of Multiple Organ Diseases in the Elderly,2004,3(4):283-288.
Authors:PAN Tiecheng  XU Lijun  LI Jun  
Institution:PAN Tiecheng,XU Lijun,LI Jun,et al Department of Cardiothroracic Surgery,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:RON  tyrosine kinase receptor  nucleic acid  antisense  lung cancer cell line A549  inhibition
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