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| PCR反应体系中Mg2+浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响 | |
| 引用本文： | 盖宝东,杨新宇,赵吉生,张学文,森隆弘,滕盛启成,大内宪明,里见进,张德恒. PCR反应体系中Mg2+浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响[J]. 中国实验诊断学, 2004, 8(4): 384-386 |
| 作者姓名： | 盖宝东 杨新宇 赵吉生 张学文 森隆弘 滕盛启成 大内宪明 里见进 张德恒 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学中日联谊医院,基本外科,吉林,长春,130031 2. 大庆油田总医院,普外科 3. 日本东北大学医学部 |
| 基金项目： | 吉林省卫生厅医学科研基金资助课题2002046，中日甲状腺疾病基础研究合作项目(1993)资助 |
| 摘 要： | 目的 探讨PCR反应体系中Mg2 浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响。方法 从石蜡包埋组织中提取DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 13外显子 ,分析PCR反应体系中Mg2 浓度分别为1 5mmol L、2 0mmol L、2 5mmol L、3 0mmol L、4 0mmol L时PCR反应产物中目的基因含量及对PCR产物基因序列测定的影响。结果 5种条件扩增的目的基因经纯化后DNA含量分别为 4 8ng μl(1 5mmol L)、2 6 6ng μl(2 0mmol L)、4 0 2ng μl(2 5mmol L)、38 5ng μl(3 0mmol L)、4 4 5ng μl(4 0mmol L) ;Mg2 浓度为 4 0mmol L时PCR产物电泳图见到多条非特异性条带 ;Mg2 浓度为 2 5mmol L时PCR产物直接测序反应曲线峰图背景噪音 (噪峰 )减小 ,信噪比 (信号 噪音 )增高。结论 从石蜡包埋组织中提取DNA行PCR反应 ,Mg2 浓度为 2 5mmol L时反应特异性强 ,PCR产物质量高。较高的Mg2 浓度可以增加PCR反应产量 ,但降低反应的特异性 |
| 关 键 词： | Mg2 石蜡包埋组织 DNA提取 多聚酶链反应 DNA序列测定 |
| 文章编号： | 1007-4287(2004)04-0384-03 |
| 修稿时间： | 2003-12-12 |
Mg2+ ionic concentration influence PCR that the DNA extraction from paraffin-embedded tissues |
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| GAI Bao dong,ZHAO Ji sheng,ZHANG Xue wen,et al.. Mg2+ ionic concentration influence PCR that the DNA extraction from paraffin-embedded tissues[J]. Chinese Journal of Laboratory Diagnosis, 2004, 8(4): 384-386 | |
| Authors: | GAI Bao dong ZHAO Ji sheng ZHANG Xue wen et al. |
| Abstract: | |
| Keywords: | Mg 2 paraffin embedded tissues DNA extraction PCR sequencing |
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