| 大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 孙祯,黄赤兵,宋亚军,余雪松,贺伟峰,陈益荣,胡文刚,王晋. 大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(4): 307-310 |
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| 作者姓名： | 孙祯 黄赤兵 宋亚军 余雪松 贺伟峰 陈益荣 胡文刚 王晋 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学新桥医院泌尿外科,重庆,400037
2. 400038重庆,第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的 从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome,鉴定其对T细胞增殖的影响.方法 取出BN(RTln)大鼠的外周淋巴结及肠系膜淋巴结并研磨、离心以获得非细胞组织上清,采用超滤密度梯度离心法提取exosome.透射电镜对收集的exosome进行形态学鉴定,BCA法进行蛋白定量,SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western blot检测IL-10的表达,并通过昆合淋巴细胞培养检测其对T细胞增殖的影响.结果 两种淋巴组织来源的非细胞组织上清均含有exosome,肠系膜淋巴结源性exosome蛋白浓度[(1.92±0.10) μg/μL]显著高于外周淋巴结源性exosome[(1.57±0.06) μg/μL,P＜0.05],SDS-PAGE显示两种组织源性exosome所含蛋白种类和数量有明显差异,Western blot显示肠系膜淋巴结固有exosome中IL-10的表达显著高于外周淋巴结固有exosome,混合淋巴细胞培养结果显示肠系膜淋巴结固有exosome和外周淋巴结固有exosome对T细胞的增殖均有促进作用(P＜0.05),外周淋巴结源性exosome的促增殖作用显著大于肠系膜淋巴结源性exosome(P＜0.05).结论 肠系膜淋巴结、外周淋巴结均含有组织固有exosome,两种组织来源exosome有蛋白浓度和蛋白种类的差异,且均能促进淋巴细胞增殖,促进程度有显著差异.
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| 关 键 词： | exosome 淋巴结 超滤密度梯度离心 混合淋巴细胞培养 |
Purification of exosomes from rat mesenteric and peripheral lymph nodes and their effect on T cell proliferation |
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