可调控STAT3干扰载体抑制BIU-87细胞侵袭的体外研究 |
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引用本文: | 党微旗,唐浩,曹红,王林,陈婷梅. 可调控STAT3干扰载体抑制BIU-87细胞侵袭的体外研究[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(5): 400-403 |
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作者姓名: | 党微旗 唐浩 曹红 王林 陈婷梅 |
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作者单位: | 重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目 |
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摘 要: | 目的 探讨可调控RNA干扰载体通过抑制STAT3信号通路对膀胱癌细胞BIU-87侵袭性的影响.方法 采用受CRE重组酶调控的RNA干扰载体pSico构建针对STAT3的shRNA表达载体,以pLVX-CRE作为CRE蛋白的表达载体,将BIU-87细胞分为pSico-shNeg、pSico-shNeg/CRE、pSico-shSTAT3、pSico-shSTAT3/CRE 4组,分别转染相应质粒,RT-PCR和Western blot法检测其干扰效率,Transwell实验检测其侵袭能力.结果 双酶切及测序证实载体构建正确;各组细胞在转染重组质粒后EGFP的表达受CRE调控;RT-PCR结果显示STAT3的表达在干扰之后有显著降低.Western blot结果显示,在无CRE时,pSico-shSTAT3组与pSico-shNeg组STAT3的表达无显著差异(P>0.05),在有CRE时,pSico-shSTAT3组STAT3相对表达量下降为pSico-shNeg组的(43±4.2)%(P<0.05);体外侵袭实验显示pSico-shNeg组透膜细胞数为(203.33±12.42)/视野、pSico-shNeg/CRE组(196.33±11.85)/视野、pSico-shSTAT3组(201.00±16.64)/视野,而pSico-shSTAT3/CRE组(42.00±3.00)/视野,较其他3组显著降低(P<0.01).结论 由可调控RNA干扰载体介导的CRE依赖性STAT3表达载体能降低细胞内STAT3信号水平,并降低BIU-87细胞体外侵袭迁移能力.
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关 键 词: | STAT3 RNA干扰 BIU-87细胞 CRE 侵袭 |
Effect of CRE-dependent RNA interference targeting STAT3 on invasion and migration in human bladder cancer BIU-87 cells |
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Abstract: | |
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