UC-MSC经PI3K/AKT信号通路影响人肺腺癌A549 细胞的凋亡和增殖

摘要] 目的:探讨人脐带来源间充质干细胞（umbilical cord-derived mesenchymal stem cell, UC-MSC）经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549 细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制。方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养，用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型。收集UC-MSC培养上清，建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549 细胞株的体外间接共培养体系。采用CCK-8 法检测A549 细胞增殖率，通过Annexin V/PI 染色流式细胞术检测A549 细胞的凋亡率，通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布；qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2 等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平；Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平。结果:人脐带组织分离培养3 周后，可见纤维状细胞铺满培养瓶，平行排列或呈旋涡状生长。流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105，不表达CD45 和HLA-DR。UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549 细胞株在体外间接共培养后，与对照组比较，A549 细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高，其细胞周期明显停滞在G1期（均P<0.01）。PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1 和Bcl-2 转录下调、BAX的转录上调（均P<0.01）；UCMSC条件培养基培养的A549 细胞总AKT水平不变，p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降（P<0.01）。结论:UC-MSC明显影响肺腺癌A549 细胞的增殖和凋亡能力，细胞周期停滞在G1 期，其主要作用机制是UC-MSC抑制A549 细胞PI3K/AKT信号通路，为探索UC-MSC临床应用的安全性和有效性提供实验依据。

UC-MSCs affects apoptosis and proliferation of human lung adenocarcinoma A549 cells via PI3K/AKT signaling pathway