RNAi抑制iASPP基因表达对大肠癌细胞凋亡的影响及机制

摘 要：［目的］ 探讨RNAi抑制iASPP基因表达对大肠癌细胞凋亡的影响。［方法］ 参照脂质体LipofectamineTM2000转染说明转染iASPP的siRNA（iASPP-siRNA组）进入人大肠癌LoVo细胞株，并设置阴性对照组（转染无义的siRNA序列）和空白对照组（仅加入脂质体），Western bloting检测转染48h的3组细胞中iASPP的蛋白表达；CCK8法于转染的24h、48h、72h检测细胞活力；流式细胞术检测转染48h的细胞凋亡率；Western blotting检测Ki-67、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase3）、STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)的蛋白表达。［结果］ iASPP-siRNA组（0.108±0.013）LoVo细胞株iASPP的蛋白表达显著低于空白对照组（0.389±0.036）（P<0.05）；iASPP-siRNA组细胞在24h（0.267±0.034）、48h（0.495±0.067）和72h（0.682±0.068）的活力细胞均显著低于空白对照组（0.385±0.042、0.688±0.074、0.977±0.097）（P<0.05），在48h的细胞凋亡率（11.18%±0.78%）显著高于空白对照组（2.13%±0.45%）（P<0.05）。Ki-67（0.126±0.018）和p-STAT3（0.110±0.012）的蛋白表达水平显著低于空白对照组（0.365±0.045、0.169±0.018），Caspase3（0.197±0.020）表达水平高于空白对照组（0.086±0.009）（P<0.05），3组间STAT3蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。［结论］通过RNAi抑制iASPP基因表达可降低大肠癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，机制可能是下调STAT3信号，对细胞增殖的影响是下调Ki-67表达，凋亡的影响是上调Caspase3表达。

Effect of Inhibiting of iASPP Gene Expression by RNA Interference on Apoptosis of Colorectal Cancer Cells