| 人CD147胞内结构域蛋白的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 吴东,南刚,李佳悦,刘芬玲,崔洪勇.人CD147胞内结构域蛋白的表达与纯化[J].转化医学杂志,2019,8(6):326-328. |
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| 作者姓名： | 吴东 南刚 李佳悦 刘芬玲 崔洪勇 |
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| 作者单位： | 陕西 西安，空军军医大学基础医学院学员一大队,陕西 西安，空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室,陕西 西安，空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室,陕西 西安，空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室,陕西 西安，空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室 |
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| 摘 要： | 目的 构建人CD147胞内结构域（CD147 intracellular domain，CD147ICD）融合蛋白质粒，表达、提取、纯化CD147ICD蛋白并进行蛋白质互作分析。方法 将CD147ICD的cDNA片段插入pET-32a(+)质粒载体后，转化大肠杆菌Origami B(DE3)感受态细胞，大量培养后用异丙基硫代-β-d-半乳糖苷诱导蛋白表达，超声破碎法裂解细胞，采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白，经凝血酶酶切、超滤后获得CD147ICD蛋白。结果 CD147ICD融合蛋白质粒经测序比对后表明构建成功；采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化的TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白纯度和浓度均较高，经凝血酶酶切、超滤后获得的CD147ICD蛋白纯度在95%以上，蛋白浓度为0.74 mg/mL。结论 纯化出了高纯度的、具有生物学活性的CD147ICD蛋白，为CD147ICD互作分子的鉴定及结构解析奠定了基础。
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| 关 键 词： | CD147 胞内结构域 表达与纯化 |
Expression and purification of the intracellular domain of human CD147 protein |
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| Authors: | WU Dong NAN Gang LI Jiayue LIU Fenling and CUI Hongyong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD147 Intracellular domain Expression and purification |
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