| 人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究 |
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| 引用本文： | 谢宇锋,盛伟华,缪竞诚,杨吉成.人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究[J].中国免疫学杂志,2006,22(12):1086-1091. |
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| 作者姓名： | 谢宇锋 盛伟华 缪竞诚 杨吉成 |
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| 作者单位： | 苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室,苏州,215123 |
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| 摘 要： | 目的：构建重组原核表达载体pCEX-5X-3／hIL-17F，使其在大肠杆菌中表达，获得GST-hIL-17F融合蛋白，并研究其生物学活性。方法：利用PCR法从自行构建的含hIL-17F基因的pUCm-T／hIL-17F载体中扩增其成熟肽基因序列，亚克隆于pGEX-SX-3中，构建原核表达载体pGEX-5X-3／hIL-17F，并在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达包涵体融合蛋白，经纯化后进行Western blot鉴定。MTT法分析GST-hIL-17F纯品蛋白对人脐静脉内皮细胞ECV304的生长抑制作用，EUSA法检测对ECV304内皮细胞表达IL-6、IFN-γ和TNF-α的生物学作用，并采用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）法分析其对血管形成的影响。结果：GST-hIL-17F融合蛋白在大肠杆菌BL21中获得了高效表达，约占菌体总蛋白的55％，能产生约41kD的融合蛋白，且Western blot证实确为GST-hIL-17F目的蛋白。CST-ML-17F具有明显抑制ECV304内皮细胞增殖和上调表达IL-6的生物学效应，并具有显著的抗血管形成活性。结论：ML-17F重组原核表达和血管形成抑制效应的初步研究已获成功，为进一步研究rhIL-17F的抗血管形成机制和临床应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 白细胞介素17F GST-融合蛋白 生长抑制 血管形成 |
| 文章编号： | 1000-484X（2006）12-1086-06 |
| 收稿时间： | 2005-01-30 |
| 修稿时间： | 2005-01-302005-04-13 |
Recombinant expression of human IL-17F fusion protein in E.coli and the study on its biological activity in vitro |
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| XIE Yu-Feng,SHENG Wei-Hua,MIAO Jing-Cheng,YANG Ji-Cheng.Recombinant expression of human IL-17F fusion protein in E.coli and the study on its biological activity in vitro[J].Chinese Journal of Immunology,2006,22(12):1086-1091. |
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| Authors: | XIE Yu-Feng SHENG Wei-Hua MIAO Jing-Cheng YANG Ji-Cheng |
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| Institution: | Department of Cellular and Molecular Biology, Medical School, Suzhou University, Suzhou 215123, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IL-17F GST-fusion protein Growth inhibition Angiogenesis |
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