| 动物源性肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR快速检测研究 |
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| 作者姓名： | 陈雅君 王亚宾 张莉娟 张龙现 陈丽颖 刘中原 申果 胡慧 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州 450002;河南省动物性食品安全重点实验室,郑州 450002
2. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002 |
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| 基金项目： | Luohe City，河南省重大公益科研项目，漯河市科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7及其3个主要毒力基因(hylA、eaeA和stx2基因)的多重PCR方法.方法 根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原rfbE基因、鞭毛抗原fliC基因、溶血素(hlyA)基因、紧密黏附素(eaeA)基因和志贺样毒素2(stx2)基因为靶基因,设计5对特异性引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了临床样品的检测.结果 该方法扩增目的基因片段分别为327 bp、247 bp、494 bp、384bp和779 bp,特异性和灵敏度均高,细菌纯培养物的检测灵敏度为104 cfu/mL.结论 初步建立了快速、灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157∶H7的分子流行病学调查及食品微生物检测.
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| 关 键 词： | 动物源性 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 毒力基因 多重PCR |
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