p38MAPK信号通路与应力介导成肌细胞的凋亡*

背景：在体内条件下，细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果。 目的：在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上，研究p38MAPK信号通路在成肌细胞凋亡中的作用及其机制。 方法：将体外培养的C2C12细胞分为对照组和SB203580组，SB203580组中加入 20 mmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580。应用细胞应力加载装置Flecell Strain Unit-5000T给细胞提供15%的力值，分别施加0，6，12，24 h的周期性张应力。每分钟10个循环，每循环包括3 s牵张，3 s松弛。Hoechst 33258染色观察细胞的形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；RT-PCR法检测促凋亡基因bax mRNA的表达；Western blot检测信号通路中p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达。 结果与结论：随着加力时间的延长，细胞逐渐出现核固缩及凋亡小体，凋亡率增加(P < 0.05)，bax mRNA表达增多(P < 0.05)；细胞p38MAPK和p-p38MAPK蛋白均在加力6 h达到最低，此后逐渐升高。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制加力引起的细胞凋亡，减少bax mRNA及p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达(P < 0.05)。说明p38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的作用。