| 迁移侵袭抑制蛋白MIIP的GST融合蛋白表达及生物学活性鉴定 |
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| 引用本文： | 高玉婧;吕叶;裴秀英;孙玉宁;杨怡;姚青;张茜;李建宁.迁移侵袭抑制蛋白MIIP的GST融合蛋白表达及生物学活性鉴定[J].宁夏医科大学学报,2013(12):1314-1317,1321. |
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| 作者姓名： | 高玉婧;吕叶;裴秀英;孙玉宁;杨怡;姚青;张茜;李建宁 |
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| 作者单位： | 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室,宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室生物化学与分子生物学系;宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81101601);宁夏自然科学基金(NZ11125);宁夏医科大学“博士学位建设学科”开放课题(KF2010-25) |
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| 摘 要： | 目的构建人MIIP蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及生物学活性鉴定。方法 RT-PCR扩增得到人MIIP基因全长编码序列,采用重组DNA技术将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建获得重组原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP,经酶切鉴定及测序验证完全正确后,将其转化至大肠杆菌BL21细胞中,用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经纯化获得目的蛋白,用Western blot鉴定所得融合蛋白。结果构建了pGEX-4T-1-MIIP原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了GST-MIIP融合蛋白,经Glutathione Agarose纯化和Western blot检测,证实所得GST-MIIP融合蛋白具有生物学活性。结论成功获得了有生物学活性的GST-MIIP融合蛋白。
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| 关 键 词： | pGEX-4T-1-MIIP GST-MIIP 原核表达 融合蛋白 |
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