MiR-124对食管癌细胞增殖和侵袭的作用及机制研究

摘 要：［目的］检测miR-124及其靶基因CREB1在食管癌组织中的表达情况，探讨miR-124/CREB1在人食管鳞癌细胞KYSE-150体外增殖和侵袭中的作用及机制。［方法］ 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测32例食管鳞状细胞癌(ESCC)组织及周围正常组织的miR-124和CREB1表达。Targetscan分析miR-124与CREB1的结合位点，荧光素酶基因报告实验验证miR-124 与CREB1是否结合；过表达或抑制miR-124后，采用Western blot检测KYSE-150细胞中CREB1的表达；在KYSE-150细胞中转染miR-124 mimic为miR-124 mimic或转染miR-124抑制剂为anti-mi-R124，转染后24h、48h、72h收集细胞计数，检测细胞增殖情况；转染24h后通过体外侵袭实验检测过表达或抑制miR-124对KYSE-150细胞侵袭的影响。在KYSE-150细胞中转染CREB1 siRNA后24h、48h、72h收集细胞计数，检测细胞增殖情况；转染CREB1 siRNA 24h后检测KYSE-150细胞侵袭能力的变化；在KYSE-150细胞中共同转染anti-miR-124和siCREB1，检测细胞增殖和侵袭能力变化情况。［结果］ MiR-124在食管癌组织表达降低(P<0.001)，而CREB1在食管癌组织中表达升高(P<0.001)；CREB1是miR-124下游分子，过表达miR-124抑制KYSE-150细胞中CREB1的表达(P=0.016)，抑制miR-124促进KYSE-150细胞中CREB1的表达(P<0.001)。在食管癌细胞中，过表达miR-124抑制KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05)，抑制miR-124促进KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05)；敲低CREB1抑制KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05)。敲低CREB1可抑制anti-miR-124对KYSE-150细胞增殖和侵袭的促进作用(P均<0.05)。［结论］过表达miR-124通过靶向CREB1抑制食管癌细胞的增殖和侵袭。

The Effect of MiR-124 on Proliferation and Invasion of Esophageal Cancer Cells and Its Mechanism