| 我国登革2型病毒43株基因组全长cDNA的构建 |
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| 引用本文： | 欧武,秦鄂德,杨翠红,杨佩英,于曼. 我国登革2型病毒43株基因组全长cDNA的构建[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2001, 21(2): 206-209 |
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| 作者姓名： | 欧武 秦鄂德 杨翠红 杨佩英 于曼 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病学研究所病毒室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39770036) |
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| 摘 要： | 目的 构建我国登革2型病毒43株基因组全长cDNA，为进一步研究其体外RNA转录产物的感染性，阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法 根据登革2型病毒参考株NGC株的核苷酸序列，利用DNASTAR软件设计覆盖登革2型病毒43株基因组的6对重叠引物。从感染登革2型病毒43株的乳鼠脑中提限病毒基因组RNA，采用RT－PCR分别扩增6条基因片段，并将其分别与pGEM－T载体进行连接。重组质粒用PCR进行快速鉴定，并在377A型自动测序仪进行序列分析。然后利用单一酶切位点，分别自阳性重组子上切下各基因片段，在体外分别进行5′半分子和3′半分子的连接，最后将5′和3′半分子连接成基因全长的cDNA。扩增各接头两侧长约457－691bp的基因片段，连接至T载体后测序，从而对全长cDNA进行鉴定。结果 共扩增出6条约1．5－2．5kb的基因自然，并在体外进行连接，获得了全长cDNA。结论 通过测序证实成功地构建了我国登革2型病毒43株基因组全长cDNA分子。本研究结果将为阐明我国登革病毒株的毒力及致病机理奠定基础。
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| 关 键 词： | 登革病毒感染 基因组 全长cDNA 登革病毒 |
| 修稿时间： | 1999-12-04 |
Construction of the full-length cDNA of dengue type 2 virus isolated in China |
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| OU Wu,QIN E'de,YANG Cuihong,et al.. Construction of the full-length cDNA of dengue type 2 virus isolated in China[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2001, 21(2): 206-209 |
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| Authors: | OU Wu QIN E'de YANG Cuihong et al. |
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| Affiliation: | OU Wu,QIN E'de,YANG Cuihong,et al. Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,P. R. China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dengue 2 virus Full length cDNA Chinese strain |
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