| 原核表达小鼠可溶性Fas抑制活化诱导的脾细胞凋亡研究 |
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| 引用本文： | 梅奕,李佳楠,陈雪玲,吴雄文,梁智辉. 原核表达小鼠可溶性Fas抑制活化诱导的脾细胞凋亡研究[J]. 华中医学杂志, 2008, 32(4) |
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| 作者姓名： | 梅奕 李佳楠 陈雪玲 吴雄文 梁智辉 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030;华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030;华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030;华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030;华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的 观察原核表达、制备小鼠可溶性Fas用于抑制活化诱导的脾细胞凋亡的效果.方法 通过RT-PCR从小鼠胸腺中扩增可溶性Fas基因,克隆至原核表达载体pET-28a( ),构建pET-sFas重组质粒,转化大肠杆菌BL21,经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后获得高表达的可溶性Fas.经镍柱亲和层析纯化后用于抑制刀豆素A(ConA)刺激下的脾细胞活化诱导凋亡.结果 基因测序、Western-blot鉴定证实为可溶性Fas的原核表达蛋白,该蛋白能抑制小鼠脾细胞在ConA刺激下发生的凋亡[对照组凋亡率(70.3±4.9)%和实验组凋亡率(8.5±0.4.35)%有极显著差异(P<0.01)].结论 原核表达的可溶性Fas能够抑制小鼠脾细胞在ConA刺激下发生凋亡,为进一步抑制活化的T淋巴细胞凋亡及体外大量制备抗原特异性T细胞提供思路.
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| 关 键 词： | 可溶性Fas 原核表达 抑制 凋亡 |
Inhibitory effect of prokaryotic expressed, murine sFas on apoptosis of ConA-activated splenocytes |
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