| 摘 要： | 目的观察半夏泻心汤对骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体诱导的人胃癌细胞BGC-823增殖的影响,探讨其相关作用机制。方法利用Transwell小室将BMSCs外泌体与BGC-823细胞进行非接触共培养,实验分为空白组、模型组、阳性对照组和半夏泻心汤高、中、低剂量组,荧光染料Dil标记BMSCs外泌体,激光共聚焦显微镜观察BGC-823细胞对BMSCs外泌体的摄取,计算平均光密度(MOD);实时无标记细胞分析技术检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;RT-q PCR检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1及C-myc m RNA的表达。结果与空白组比较,模型组细胞内可见大量红色荧光标记,MOD值显著增加(P0.05);模型组20~50 h细胞指数(CI)显著增加(P0.05),G_1、G2期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著升高(P0.05);与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组红色荧光标记减弱,其中半夏泻心汤高、中剂量组MOD值明显减少(P0.05),半夏泻心汤各剂量组20~50hCI显著减少(P0.05),G_1、G2期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著降低(P0.05)。结论半夏泻心汤可抑制BMSCs外泌体诱导的BGC-823细胞增殖,其机制可能与下调Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达,抑制Shh信号通路有关。
|
