| 无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株选择性剪接的研究 |
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| 引用本文： | 王刚,孙雯雯,朱履锴,马艳春,张夏林,张建华,任娟,秦秀玉,杨林花,柴宝峰. 无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株选择性剪接的研究[J]. 中国实验血液学杂志, 2021, 0(1) |
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| 作者姓名： | 王刚 孙雯雯 朱履锴 马艳春 张夏林 张建华 任娟 秦秀玉 杨林花 柴宝峰 |
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| 作者单位： | 山西医科大学第二临床医学院（山西医科大学第二医院）血液科;山西医科大学血液病学研究所;山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81700182,31772450,81970172);山西省重点研发计划(201803D31123)。 |
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| 摘 要： | 目的:探讨无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株发生选择性剪接的分子机制。方法:将人凝血因子IX小基因(Mini-hF9)及其无义突变体分别转染哺乳动物细胞HeLa,经G418抗性筛选、单克隆化得到稳定细胞株;通过RT-PCR及Western blot分别检测稳定细胞株中Mini-hF9基因mRNA的选择性剪接及蛋白表达情况。结果:成功构建了野生型和无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株HeLa-F9-WT、HeLa-F9-M1和HeLa-F9-M2。野生型稳定细胞株HeLa-F9-WT中扩增到正常剪接产物Norm;无义突变稳定细胞株HeLa-F9-M1中扩增到Norm和Alt-S1这两种剪接产物,HeLa-F9-M2中扩增到Norm、Alt-S1和Alt-S2这三种剪接产物。结论:无义突变的凝血因子IX基因可能触发无义相关的选择性剪接(NAS)途径,导致选择性剪接的产生。
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| 关 键 词： | 血友病 凝血因子Ⅸ小基因 无义突变 稳定细胞株 无义相关的选择性剪接 |
Altered Splicing in Stable Cell Strains Expressing Mini-hF9 Gene with Nonsense Mutation |
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| WANG Gang,SUN Wen-Wen,ZHU Lv-Kai,MA Yan-Chun,ZHANG Xia-Lin,ZHANG Jian-Hua,REN Juan,QIN Xiu-Yu,YANG Lin-Hua,CHAI Bao-Feng. Altered Splicing in Stable Cell Strains Expressing Mini-hF9 Gene with Nonsense Mutation[J]. Journal of experimental hematology, 2021, 0(1) |
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| Authors: | WANG Gang SUN Wen-Wen ZHU Lv-Kai MA Yan-Chun ZHANG Xia-Lin ZHANG Jian-Hua REN Juan QIN Xiu-Yu YANG Lin-Hua CHAI Bao-Feng |
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| Affiliation: | (Department of Hematology,The Second Clinical Medical College(The Second Hospital),Shanxi Medical University;Institute of Hematology,Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,Shanxi Province,China;Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education,Shanxi University,Taiyuan 030006,Shanxi Province,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hemophilia Mini-hF9 gene nonsense mutation stable cell strain nonsense-associated altered splicing |
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