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胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异分析
引用本文:谢薇,梁清华,杨波,蔡颖,何金华,关勇军,左晓霞.胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异分析[J].中国免疫学杂志,2007,23(3):212-217,219.
作者姓名:谢薇  梁清华  杨波  蔡颖  何金华  关勇军  左晓霞
作者单位:1. 中南大学湘雅医院中西医结合研究所,长沙,410008
2. 湖南省儿童医院免疫科,长沙,410007
3. 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,长沙,410008
4. 中南大学湘雅医院风湿科,长沙,410008
摘    要:目的类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与RA发病机制相似的胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠动物模型,运用蛋白质组技术对正常大鼠和CIA大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析,为鉴定CIA大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究RA发病机制奠定基础。方法用牛Ⅱ型胶原和完全福氏佐剂建立CIA大鼠模型,采用一步抽提法抽提滑膜蛋白质,运用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各组大鼠滑膜组织的总蛋白质,用PDquest软件分析图谱,比较差异蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应肽质指纹图谱,用Mascot查询软件搜索数据库,鉴定部分差异蛋白质。结果成功建立了CIA大鼠模型,获得分辨率较高、重复性较好的大鼠滑膜组织双向电泳凝胶图谱。正常组与25、35和45天模型组大鼠滑膜组织凝胶图谱的平均蛋白质点数分别为1070±41、1049±22、1079±44和1088±39。在4个组均有表达差异的蛋白质点中随机取20个点进行肽质指纹图分析,鉴定了部分与细胞代谢、信号转导及结构相关的差异表达蛋白质。结论建立了分辨率较高且重复性较好的正常大鼠与CIA大鼠不同时间点滑膜组织的双向凝胶电泳图谱,鉴定了一些与CIA大鼠滑膜病变相关的差异表达蛋白质,为识别RA病变相关蛋白质及推断RA病变过程奠定基础。

关 键 词:胶原诱导关节炎  蛋白质组  双向凝胶电泳
文章编号:1000-484X(2007)03-0212-07
修稿时间:2005-09-202005-12-05

Two dimensional gel electrophoresis and comparative proteome analysis of collagen-induced arthritis(CIA) rat synovium
XIE Wei,LIANG Qing-Hua,YANG Bo,CAI Ying,HE Jin-Hua,GUAN Yong-Jun,ZUO Xiao-Xia.Two dimensional gel electrophoresis and comparative proteome analysis of collagen-induced arthritis(CIA) rat synovium[J].Chinese Journal of Immunology,2007,23(3):212-217,219.
Authors:XIE Wei  LIANG Qing-Hua  YANG Bo  CAI Ying  HE Jin-Hua  GUAN Yong-Jun  ZUO Xiao-Xia
Institution:Combined Chinese and Western Medicine Institution, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008, China
Abstract:
Keywords:MALDI-TOF-MS
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