HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化 |
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引用本文: | 魏容,曾建明,袁颖,王雅珍,黄世峰,罗红伟,肖青,陈新敏,冯文莉.HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化[J].第四军医大学学报,2009,30(10):877-880. |
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作者姓名: | 魏容 曾建明 袁颖 王雅珍 黄世峰 罗红伟 肖青 陈新敏 冯文莉 |
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作者单位: | 魏容,曾建明,王雅珍,黄世峰,罗红伟,陈新敏,冯文莉,WEI Rong,ZENG Jian-Ming,WANG Ya-Zheng,HUANG Shi-Feng,LUO Hong-Wei,CHEN Xin-Min,FENG Wen-Li(重庆医科大学,临床血液学教研室,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016);袁颖,YUAN Ying(重庆医科大学,临床医学系,重庆,400016);肖青,XIAO Qing(重庆医科大学,附属第一医院血液科,重庆,400016)
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摘 要: | 目的:采用核不均一核糖核蛋白E2(hnRNP E2)decoy RNA靶向阻断CCAAT增强子结合蛋白alpha(C/EBPα)基因的异常翻译,诱导小鼠白血病样32D-P210细胞株向粒系分化,并进一步探讨其分子机制.方法:电穿孔法分别将野生型和突变型hnRNP E2 decoy RNA表达质粒转染入32D-P210细胞,经G418筛选出稳定株后,RT-PCR检测C/EBPa,粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)与髓过氧化物酶(MPO)基因的mRNA水平;WesternBlot检测C/EBPa,G-CSFR的蛋白表达水平;瑞氏染色观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激前后细胞形态;流式细胞仪检测分化抗原Gr-1,CD11b的表达.结果:筛选到分别稳定表达野生型或突变型hnRNP E2 decoy RNA的TG细胞株和TGA细胞株.与未转染组32D-P210细胞相比,TG细胞株C/EBPa mRNA水平无改变,但42ku-C/EBPa蛋白、G-CSFR mRNA和MPO mRNA水平分别升高了(43.8±4.9)%,(69.1±3.2)%和(37.8±4.2)%(P〈0.05);G-CSF刺激后,TG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞形态学特征;同时Gr-1分化抗原的表达率上升至40.3%,未转染组32D-P210细胞的Gr-1表达率5.5%(P〈0.05);然而CD11b在3组细胞都是高表达,没有明显的变化(P〉0.05);以上各参数在TGA细胞株与未转染组32D-P210细胞株间均无显著性差异(P〉0.05).结论:hnRNP E2 decoy RNA能够诱导32D-P210细胞向粒系分化,其机制可能与decoy RNA特异性阻断hnRNAE2与C/EBPα mRNA非翻译区结合,调节C/EBPα mRNA翻译,恢复42ku-C/EBPα表达,上调其下游G-CSFR和MPO等分化基因的表达有关.G-CSF可加速这一作用从而促进32D-P210细胞的分化过程.
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关 键 词: | 32D-P210 decoy RNA 细胞分化 核不均一核糖核蛋白E2 |
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