| PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定 |
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| 引用本文： | 于占红,杨金菊,刘静,迟俊,陈苗,柳晓兰,刘莹,高建恩,孙启鸿. PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2009, 25(12) |
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| 作者姓名： | 于占红 杨金菊 刘静 迟俊 陈苗 柳晓兰 刘莹 高建恩 孙启鸿 |
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| 作者单位： | 1. 蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心抗体工程研究室,军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,102206;北京军区北戴河疗养院,河北,北戴河,066100
2. 蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心抗体工程研究室,军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)资助项目，国家重点基础研究发展计划(973)资助项目，国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:制备PON2(paraxonase2)单克隆抗体(mAb),并进行初步鉴定.方法:利用生物信息学方法分析人类PON2蛋白序列,选取与小鼠同源性低,而免疫原性与亲水性均较强的片段,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PON2和PET-32a-PON2,GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白在大肠杆菌中进行表达, 以HIS-PON2作为免疫原制备鼠mAb,以GST-PON2作为筛选抗原.采用Western blot、间接免疫荧光鉴定mAb的特异性.结果:GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白均在大肠杆菌中获得高效表达,经常规的细胞融合和筛选获得2株可稳定分泌抗PON2的杂交瘤细胞株,这2株抗体可以识别HepG2细胞中的靶蛋白.结论:成功制备出2株抗PON2的mAb,并通过免疫荧光技术检测了该蛋白在HepG2细胞中的分布,为进一步进行PON2蛋白的的研究提供了有效的工具.
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| 关 键 词： | 原核表达 单克隆抗体 |
Preparation and identification of PON2 monoclonal antibodies |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | paraxonase2(PON2) |
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