| 兔骨髓间充质干细胞体外培养定向诱导为成骨细胞的生物学特征 |
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| 引用本文： | 徐卫袁,贾竹亭,孙锋,严飞,王黎明. 兔骨髓间充质干细胞体外培养定向诱导为成骨细胞的生物学特征[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2009, 13(24). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.24.003 |
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| 作者姓名： | 徐卫袁 贾竹亭 孙锋 严飞 王黎明 |
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| 作者单位： | 1. 张家港市第一人民医院骨科,江苏省张家港市,215600
2. 江苏大学临床医学院,江苏省苏州市,212013 |
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| 摘 要： | 背景:脊柱和创伤骨科的重建修复对骨的需求量极大,但现实的供需缺点和矛盾限制了植骨运用,急需找寻一种替代途径.目的:探索骨髓间充质干细胞体外分离培养的最佳实验条件,并观察其生物学特征.设计、时间及地点:细胞水平的体外组织工程实验,于2007-05/2008-05在苏州大学附属儿童医院骨科实验室完成.材料:选择4周龄雄性新两兰大耳白兔,由苏州大学动物中心提供.方法:自股骨大转子及髓腔抽取新西兰大耳白兔骨髓,采用密度梯度离心法获取离心层骨髓单个核细胞,体外接种连续培养观察,原代接种后48 h首次换液,此后每二三天全量换液;待细胞长至90%汇合时,用胰酶和EDTA混合液消化传代.主要观察指标:采用倒置显微镜下进行细胞生长形态观察,四唑盐比色法测定细胞活性并描绘细胞生长曲线:另选择P3代细胞进行成骨条件培养液培养4周,应用Gomori钙钴染色法鉴定成骨分化的标志物--碱性磷酸酶阳性细胞,应用Von-Kossa 改良染色法测定钙节结.结果:分离培养的骨髓间充质干细胞生长形态和增殖活性良好,接种后的细胞由短梭形向长梭形、三角形乃至多角性发展,各代细胞有明显的生长潜伏期、对数增长期和平台期,细胞可以连续培养至P9代.经成骨诱导分化的细胞碱性磷酸酶染色阳性率为93%,矿化结节染色阳性.结论:骨髓间充质干细胞体外分离、扩增简单可行,可以定向诱导为成骨细胞.
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| 关 键 词： | 骨髓细胞 干细胞 细胞分化 成骨细胞 |
Biological features of rabbit's bone marrow mesenchymal stem cells differentiating into osteoblasts in vitro |
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| Xu Wei-yuan,Jia Zhu-ting,Sun Feng,Yan Fei,Wang Li-ming. Biological features of rabbit's bone marrow mesenchymal stem cells differentiating into osteoblasts in vitro[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2009, 13(24). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.24.003 |
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| Authors: | Xu Wei-yuan Jia Zhu-ting Sun Feng Yan Fei Wang Li-ming |
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