| 过表达死亡结构相关蛋白加剧胆固醇β环糊精诱导的巨噬细胞凋亡 |
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| 引用本文： | 邱飞,崔淑华,杨冬梅,文娟,李天平,张燕,熊国祚,庹勤慧.过表达死亡结构相关蛋白加剧胆固醇β环糊精诱导的巨噬细胞凋亡[J].中国动脉硬化杂志,2016,24(3):239-244. |
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| 作者姓名： | 邱飞 崔淑华 杨冬梅 文娟 李天平 张燕 熊国祚 庹勤慧 |
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| 作者单位： | 湖南中医药大学药学院,湖南省长沙市410208;南华大学生命科学学院药物药理研究所,湖南省衡阳市421001;湖南中医药大学药学院,湖南省长沙市410208;南华大学生命科学学院药物药理研究所,湖南省衡阳市421001;南华大学生命科学学院药物药理研究所,湖南省衡阳市421001;南华大学生命科学学院药物药理研究所,湖南省衡阳市421001;南华大学第二附属医院普外科,湖南省衡阳市421001;湖南中医药大学药学院,湖南省长沙市410208;南华大学生命科学学院药物药理研究所,湖南省衡阳市421001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31371161,30971267)；湖南省高校创新平台开放基金项目(12K096)；湖南省杰出青年基金(14JJ1024,2015JJ2117) |
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| 摘 要： | 目的巨噬细胞凋亡在动脉粥样斑块的发展、病灶的坏死、斑块的不稳定以及急性血管事件中起着重要的作用,因此研究死亡结构相关蛋白(Daxx)对巨噬细胞凋亡的调控作用有利于揭示新的药物靶点,为动脉粥样硬化的发生与发展提供理论依据。方法应用脂质体2000将p CDNA3.1-Daxx、p CDNA3.1转入RAW264.7细胞中,G418(500 mg/L)筛选15天后,建立过表达Daxx稳定细胞株,RT-PCR和Western blot检测稳定细胞株内Daxx的转染效率。模型组和转染的细胞用胆固醇β环糊精(Chol∶MβCD)孵育48 h,建立RAW264.7荷脂和细胞凋亡模型,运用酶荧光法检测细胞内胆固醇蓄积情况,MTT检测细胞活性,流式细胞术观察细胞凋亡。Western blot测定细胞内Caspase3蛋白的表达。结果 RT-PCR和Western blot检测转染细胞内Daxx mRNA和蛋白明显高表达,表明稳定转染成功。在Chol∶MβCD的诱导下,模型组细胞内胆固醇的含量升高,细胞活性下降,凋亡数目增加。而Daxx高表达组可以加剧Chol∶MβCD诱导的胆固醇蓄积,细胞活性显著下降,凋亡细胞数目明显增加;同时,Daxx转染细胞组Caspase3蛋白表达明显增高。结论过表达Daxx可以加剧胆固醇β环糊精诱导的巨噬细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 死亡结构相关蛋白 胆固醇蓄积 巨噬细胞 细胞凋亡 |
| 收稿时间： | 2015/5/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/8/13 0:00:00 |
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