| TNNI3K基因过表达诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化 |
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| 引用本文： | 王银,徐瑞霞,马春艳,姚雨宏,叶珏,李建军. TNNI3K基因过表达诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化[J]. 中国动脉硬化杂志, 2016, 24(4): 325-333 |
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| 作者姓名： | 王银 徐瑞霞 马春艳 姚雨宏 叶珏 李建军 |
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| 作者单位： | 心血管疾病国家重点实验室血脂异常与心血管病诊治中心,;心血管疾病国家重点实验室血脂异常与心血管病诊治中心,;心血管疾病国家重点实验室血脂异常与心血管病诊治中心,;心血管疾病国家重点实验室血脂异常与心血管病诊治中心,;心血管疾病国家重点实验室,北京市 100037;心血管疾病国家重点实验室血脂异常与心血管病诊治中心, |
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| 基金项目： | 教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20101106120007)和国家自然科学基金(81100118) |
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| 摘 要： | 目的研究肌钙蛋白Ⅰ相关激酶(TNNI3K)对小鼠胚胎干细胞(m ESC)向心肌细胞分化的影响。方法从形态和细胞免疫荧光、碱性磷酸酶试验以及HE染色鉴定m ESC的多能性。采用悬滴法培养m ESC形成拟胚体(EB),自分化为跳动的心肌细胞,通过细胞免疫荧光和透射电镜(TEM)方法鉴定。慢病毒分别携带h TNNI3K基因和siRNA感染m ESC,并分别自分化为心肌细胞,通过流式细胞术(FCM)、细胞免疫荧光、Western blot等分析心肌特异性蛋白表达水平的差异。结果 m ESC表面蛋白分子SSEA-1和Oct-4表达呈阳性(绿色),ALP试验呈蓝紫色,核质比1。正常自分化的细胞免疫荧光显示cTnⅠ、cTnT、MLC2以及α-actinin阳性(绿色),肌节清晰可见。TEM显示心肌细胞独有的肌纤维亚细胞结构。过表达组cTnT+阳性细胞率高于对照组,Western blot显示心肌特异性蛋白cTnT、cTnⅠ、MLC2、α-actinin等显著高于对照组,且细胞免疫荧光结果显示MHC6蛋白提前表达。干扰组不仅cTnT+阳性细胞率显著低于对照组,而且心肌特异蛋白也显著低于对照组,MHC6蛋白表达延后。结论TNNI3K基因能增强心肌细胞的生成,促进m ESC向心肌细胞的分化。
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| 关 键 词： | 小鼠胚胎干细胞 肌钙蛋白Ⅰ相关激酶 心肌细胞 |
| 收稿时间： | 2016-01-15 |
| 修稿时间： | 2016-03-07 |
The Overexpression of Cardiomyocyte-specific Kinase TNNI3K Induces Mouse Embryonic Stem Cells Differentiation into Cardiomyocytes |
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| WANG Yin,XU Rui-Xi,MA Chun-Yan,YAO Yu-Hong,YE Jue and LI Jian-Jun. The Overexpression of Cardiomyocyte-specific Kinase TNNI3K Induces Mouse Embryonic Stem Cells Differentiation into Cardiomyocytes[J]. Chinese Journal of Arteriosclerosis, 2016, 24(4): 325-333 |
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| Authors: | WANG Yin XU Rui-Xi MA Chun-Yan YAO Yu-Hong YE Jue LI Jian-Jun |
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| Affiliation: | Division of Dyslipidemia & State Key Laboratory of Cardiovascular Disease,;Division of Dyslipidemia & State Key Laboratory of Cardiovascular Disease,;Division of Dyslipidemia & State Key Laboratory of Cardiovascular Disease,;Division of Dyslipidemia & State Key Laboratory of Cardiovascular Disease,;State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital & National Center for Cardiovascular Diseases & Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100037, China;Division of Dyslipidemia & State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, |
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| Abstract: | |
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