栀子苷介导GLP-1R/Akt信号通路改善大鼠脑缺血再灌注损伤和神经元凋亡的研究

目的 观察栀子苷对脑缺血再灌注损伤（CIRI）模型大鼠的神经保护作用及对胰高血糖素样肽-1受体（GLP-1R）/蛋白激酶B（Akt）信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组，模型组，栀子苷低、高剂量组及尼莫地平片组，每组10只。采用线栓法制备CIRI大鼠模型，缺血2 h再灌注24 h后，栀子苷低、高剂量组大鼠分别ig给予10、40 mg·kg^-1的栀子苷，尼莫地平片组大鼠ig给予8.1 mg·kg^-1尼莫地平，假手术组和模型组大鼠ig等体积生理盐水，每天1次，连续7 d。造模后及给药结束后，分别对各组大鼠进行神经功能缺损评分；给药结束后，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）及白细胞介素-6（IL-6）水平，苏木素-伊红（HE）染色检测脑组织病理学变化，尼氏染色检测神经元与尼氏小体变化，免疫组化染色检测脑组织B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2关联X蛋白（Bax）表达，蛋白质印迹法（Western blotting）检测脑组织细胞色素C（Cyt-C）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶-9（Caspase-9）、胰高血糖素样肽-1受体（GLP-1R）及磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高（P＜0.05），血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高（P＜0.05）；皮质细胞间质疏松、增宽，有大量神经元细胞质萎缩和细胞核损伤；脑神经元皱缩，尼氏小体变小，数目明显减少。大鼠脑组织Bcl-2表达显著降低（P＜0.05），Bax表达显著升高（P＜0.05）；脑组织中Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平显著升高（P＜0.05），GLP-1R和p-Akt蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，栀子苷高剂量组和尼莫地平片组大鼠神经功能缺损评分均显著降低（P＜0.05），血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低（P＜0.05），皮质细胞较为整齐，神经元细胞和尼氏小体损伤减小，Bcl-2表达显著升高（P＜0.05），Bax表达显著降低（P＜0.05），同时，Cyt-C、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平显著下降（P＜0.05），GLP-1R和p-Akt蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。结论 栀子苷能够改善大鼠CIRI，减少神经元凋亡，其作用机制可能与激活GLP-1R/Akt信号通路有关。

Geniposide-mediated GLP-1R/Akt signaling pathway improves cerebral ischemia-reperfusion injury and neuronal apoptosis in rats