20-HETE对大鼠心肌缺血再灌注损伤中NADPH氧化酶活性及ROS生成的影响

目的探讨20-HETE加重大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（Con组）,缺血再灌注模型组（IR组）,IR+20-HETE合成酶抑制剂（HET0016）组,Con+HET0016组,每组12只,通过Langendorff灌流系统建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,全心缺血35 min再灌注40 min,Power Lab/8P系统实时监测心肌力学指标;灌流结束后取心肌组织TTC法检测心肌梗死面积;DHE荧光探针法检测活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）含量;Western blot检测NADPH氧化酶亚基p47^phox磷酸化水平;细胞色素C的还原法检测NADPH氧化酶活性。结果离体心脏缺血再灌注后,加入20-HETE合成酶抑制剂HET0016（1μmol/L）后明显改善了IR导致的心肌力学指标下降,LVDP由IR组的（48.6±3.4）%升至（71.7±3.5）%,+d P/dt_max由（51.9±2.1）%升至（69±3.2）%,-d P/dt_max由（47.1±3.6）%升至（64.1±3.8）%（P<0.05）;IR+HET0016组心肌梗死面积比IR组减小了37.2%（P<0.05）。DHE荧光探针检测发现IR+HET0016处理组心肌组织中ROS含量比IR组降低了45.8%（P<0.05）;最后通过对NADPH氧化酶活性检测发现,HET0016显著减少了IR引起的NADPH氧化酶p47^phox亚基磷酸化水平及全酶活性的升高（P<0.05）。结论 20-HETE通过激活NADPH氧化酶诱导过量ROS的生成,加重心肌缺血再灌注损伤。